後腎間葉細胞移植による多発性嚢胞腎治療の試み

尝试使用后肾间充质细胞移植治疗多囊肾病

• 批准号: 13770404
• 负责人: 藤田 尚代
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770404/
• 关键词: 多発性嚢胞腎; 細胞増殖; ERK; Pax2; TGF-β1; 尿管芽細胞; 周期的進展; MAPキナーゼファミリー; p38 MAPキナーゼ; 培養マウス尿管芽細胞; 周期的伸展

多発性嚢胞腎は腎不全に至る重篤な遺伝性腎疾患である。嚢胞発生機序として嚢胞上皮細胞の異常増殖が示唆されている。細胞内シグナル伝達における中枢的酵素MAPキナーゼファミリーの一つであるextracellular signal-regulated kinase(ERK)は胎児腎に発現し、ネフロン形成に必要な酵素である。また異形成腎には尿路閉塞が高率に合併する。ヒト多嚢胞性異形成腎およびヒツジ胎仔尿路閉塞モデル腎の嚢胞、異形成尿細管においてERKの発現・活性が増加している。尿管芽由来の異形成上皮では細胞増殖が亢進し、転写因子Pax2、サイトカインTGF-β1の発現が亢進していることが知られている。尿路閉塞の流体力学的変化を、培養マウス尿管芽細胞を周期的伸展(20%、20サイクル/分)および非伸展下で培養することによりin vitroで再現し、ERK活性、細胞増殖、Pax2、TGF-β1発現への影響を検討した。ImmunoblotによりERK、抗活性型ERK、Pax2発現を、BrdU取込みにより細胞増殖を評価した。またTGF-β1 mRNAをRT-PCR法により測定した。ERKは周期的伸展刺激により時間依存性に活性化された。Pax2蛋白発現も時間依存性に増加したがMEK阻害剤PD98059存在下で抑制された。BrdU取込み、TGF-β1 mRNAは24時間伸展で有意に増加したが、MEK阻害により対照と同レベルに抑制された。以上、周期的伸展は尿管芽細胞においてERK活牲化宙介した細胞増殖およびPax2、TGF-β1 mRNA発現を誘導した。ERKの活性化が胎児期尿路閉塞による嚢胞形成に関与する可能性が考えられる。

Multiple kidney diseases due to kidney insufficiency The abnormal proliferation of epithelial cells in the cell development process is also indicated. The enzyme MAP, which is essential for the development and development of fetal kidney, is a key component of intracellular signaling. A high rate of kidney disease The expression and activity of ERK in the multicellular heterogenous kidney and fetal urinary tract red kidney cells and heterogenous urinary tubules increased. Urethral bud origin, heterogenesis, cell proliferation, expression of factor Pax-2, TGF-β 1, The effects of ERK activity, cell proliferation, Pax-2 and TGF-β 1 on the development of urinary tract fluid dynamics, cell cycle elongation (20%, 20%, min) and cell cycle reproduction in vitro under culture without elongation were investigated. Immunoblot assay for ERK, anti-active ERK, Pax-2 expression, BrdU assay for cell proliferation TGF-β 1 mRNA was detected by RT-PCR. ERK activation is time-dependent upon cyclic extensional stimulation. Pax2 protein expression was inhibited in the presence of MEK inhibitor PD98059. BrdU mRNA and TGF-β 1 mRNA were intentionally increased in 24-hour stretch, and MEK was inhibited in both groups. The expression of Pax2 and TGF-β 1 mRNA was induced by ERK activity in the cell culture medium. ERK activation in fetal urinary tract is related to the possibility of cell formation.