遺伝子導入技術を利用した癌放射線治療技術の研究

利用基因转移技术进行癌症放射治疗技术的研究

• 批准号: 13770498
• 负责人: 川浦 稚代
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770498/
• 关键词: p53; 遺伝子導入; 放射線; 癌細胞

放射線感受性の低い癌細胞は、腫瘍抑制遺伝子であるp53が変異あるいは欠損していることが知られている。このような癌細胞に正常なp53遺伝子を導入した後、放射線照射を行えば、癌放射線治療の効率が向上するものと考えられる。本研究では、コレステロール誘導体を素材とした正電荷リポソームによる安全で効率のよい癌細胞への遺伝子導入技術を利用し、放射線感受性の低い癌細胞に対する放射線治療技術の改善を目的としている。In vitroにおいて正常なp53遺伝子を持つHeLa細胞、p53遺伝子に変異が確認されているASPC-1細胞、TE-1細胞にp53遺伝子(5μg)を導入し、40時間後にCo60 γ線照射装置を用いて4Gyの照射線量で一回照射を行った。照射後、4-8時間の間でp53タンパク質の産生量が増加することがウエスタンブロットにより確認された。しかし、HeLa細胞においては増殖抑制が観察されたが、いずれの細胞も照射後一週間での生存率は遺伝子導入していない条件とあまり差が無かった。遺伝子導入後0,2,4,6,8,10,20Gyで一回照射を行ったが、照射の有無による有為な差は見られなかった。In vivoでは、Wister系ラットの頭頚部および骨盤部にγ線を照射し、各種線量および照射範囲による各臓器の形態学的変化を光学顕微鏡および電子顕微鏡を用いて観察した。照射部位では線量依存的にアポトーシス様細胞が増加した。尾静注した時の導入遺伝子の生体内動態を検討した。In vivoでの遺伝子導入量および照射線量を検討した。

Cancer cells with low radiosensitivity have been found to be resistant to tumor growth. After the introduction of normal p53 gene into cancer cells, radiation irradiation and cancer radiation therapy have increased their efficiency. This study aims to improve radiation therapy techniques for cancer cells with low radiosensitivity by using the gene transfer technique for cancer cells with high radiosensitivity and high safety. In vitro, normal p53 gene expression was detected in HeLa cells, p53 gene expression was confirmed in ASPC-1 cells and TE-1 cells, p53 gene (5μg) was introduced into the cells, and 40 hours later, Co60 gamma irradiation device was used to irradiate the cells with 4 Gy of radiation. After irradiation, the amount of p53 protein produced increased from 4 to 8 hours. The survival rate of HeLa cells during the week after irradiation was not significantly different from that of HeLa cells under different conditions. 0,2,4,6,8,10,20Gy after the introduction of the gene. In vivo, the head and pelvis of the Wister system were irradiated with gamma rays, and the morphologic changes of various organs were observed by optical microscopy and electronic microscopy. The irradiation site is dependent on the amount of radiation. A study of the dynamics of the introduction of genes into the body In vivo, the amount of DNA introduced and the amount of radiation irradiated are discussed.