気分安定薬と抗うつ薬の併用によるグリア細胞での神経栄養因子の誘導

情绪稳定剂和抗抑郁药联合诱导神经胶质细胞中的神经营养因子

• 批准号: 13770556
• 负责人: 井上 雄一朗
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Nara Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770556/
• 关键词: うつ病; グリア細胞株由来神経栄養因子; アストロサイト; 神経栄養因子; 難治性うつ病; 双極性障害; 向精神薬; augmentation therapy

(目的)治療抵抗性うつ病の治療には抗うつ薬と気分安定薬の併用療法が推奨されているが、分子生物学的機序を明らかにする目的で神経栄養因子の一つであるグリア細胞株由来神経栄養因子(GDNF)に注目して培養細胞におけるGDNFの発現・分泌の変化を調査する。(方法)C6 glioma cellを培養し、リチウム、カルバマゼピン、バルプロ酸、クロミプラミンを単独または併用して培地に加え経時的に細胞を回収しtotal RNAを抽出した。cDNAを作成しReal-time detection PCRによりGDNF mRNAの定量化を行った。GDNF蛋白は細胞を培養し上と同様に抗うつ薬・気分安定薬を加えて刺激し経時的に培地を回収した。ELISA法を用いて培地中に分泌されたGDNF蛋白を定量した。GDNFの蛋白、mRNAの発現に薬剤の併用が影響を及ぼすのかを比較検討した。又、細胞内シグナル伝達系の役割を明らかにするため、様々なシグナル伝達阻害剤を培地に添加し、蛋白、mRNAの発現に与える影響を検討した。(結果)抗うつ薬単剤刺激でC6細胞におけるGDNF mRNA、蛋白の発現は時間・濃度依存的に増加した。各種気分安定薬単剤刺激ではGDNF mRNA、蛋白発現の変化は認められなかった。抗うつ薬とリチウムを併用した場合のみGDNF mRNA、蛋白の発現が濃度依存的に、かつ単剤より早期から出現した。MEK阻害剤を添加したときには有意にmRNA、蛋白発現が抑制されたが、PI3K阻害剤と併用したときにはMEK阻害剤単独より有意に発現が抑制された。(考察および結語)抗うつ薬によるC6細胞でのGDNF遺伝子・蛋白誘導がリチウムの併用でのみ増強されたことは抗うつ薬のAugmentation Therapyの作用機序の違いを示唆する。MEK阻害剤とPI3K阻害剤併用でMEK阻害剤の抑制効果を増強したことから薬剤併用によるGFNFの発現にはMAPキナーゼ系とイノシトールリン脂質系の両者の経路が関与している可能性を示唆する。

Objective: To investigate the expression and secretion of neurotrophic factor (GDNF) in cultured cells. (Method)C6 glioma cell culture, recovery, total RNA extraction, cell culture, total RNA extraction, total RNA extraction, total RNA extraction. Real-time detection PCR was used to quantify GDNF mRNA. GDNF protein is the same in cell culture as in cell culture. ELISA was used to quantify GDNF protein secreted in the medium. A comparative study of the effects of protein and mRNA expression on GDNF In addition, the effects of protein and mRNA expression on the development of intracellular protein expression system were investigated. (Results) The expression of GDNF mRNA and protein in C6 cells increased in a time-and concentration-dependent manner after anti-drug stimulation. The expression of GDNF mRNA and protein was detected by various stable stimuli. The expression of GDNF mRNA and protein is concentration-dependent and early in life. MEK inhibitors are added intentionally to inhibit mRNA and protein expression, while PI3K inhibitors are added intentionally to inhibit MEK expression. (Investigation and conclusion) GDNF gene and protein induction in C6 cells and its combination with anti-drug Therapy to enhance the anti-drug effect. The inhibition effect of MEK inhibitor and PI3K inhibitor is enhanced. The possibility of the pathway relationship between MEK inhibitor and PI 3 K inhibitor is also discussed.