INFγ発現とT細胞レセプターを指標としたマイナー組織適合抗原特異的T細胞の検出

以INFγ表达和T细胞受体为指标检测次要组织相容性抗原特异性T细胞

• 批准号: 13770578
• 负责人: 高見 昭良
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13770578/
• 关键词: リンパ性急性転化; マイナー組織適合抗原; 細胞傷害性T細胞; インターフェロンγ; T細胞レセプター; H-Yペプチド; 慢性骨髄性白血病; 細胞障害性T細胞; T細胞レセプト

Y染色体特異的マイナー組織適合抗原であるH-Yペプチドは男性にのみ発現し,HLA-A2に表出される.まず,HLA一致姉からの同種骨髄移植後に慢性骨髄性白血病リンパ性急性転化を来した男性患者(HLA-A2陽性)を対象に,患者の白血病細胞に対し高い細胞傷害活性を示すドナー由来のT細胞を作成した.H-Yペプチドでパルスしたドナー由来樹状細胞を抗原提示細胞に用いてドナーのT細胞を繰り返し刺激することにより,細胞傷害性T細胞を樹立した.この細胞傷害性T細胞は,ドナーの樹状細胞に対しパルスするペプチド濃度依存性の細胞傷害活性を示した.さらに,患者白血病細胞・線維芽細胞,男性リンパ芽球性リンパ細胞株細胞に対し,HLA-A2拘束性の細胞傷害活性を示した.次に,同じ男性患者が再移植を受けたのち分子遺伝学的寛解を維持していた時期の流血中に,インターフェロン(IFN)γ発現とT細胞レセプターを指標としてH-Yペプチド特異的T細胞を検出した.患者血液からCD8陽性細胞を分離し,H-Yペプチドで5時間刺激したところ,6.8%がIFN-γ陽性となった.このCD8陽性IFN-γ陽性細胞のT細胞レセプターβ鎖のCDR3領域をPCRにより増幅し,サイズ・スペクトラタイピングを行った.その結果,BV22においてin vitroで誘導された細胞傷害性T細胞と同じサイズのピークが検出された.塩基配列を決定したところ,患者の流血中に存在しているH-Yペプチド反応性T細胞とin vitroで樹立した細胞傷害性T細胞で共通のCDR3領域の配列が証明された.流血中に存在していたCD8陽性細胞は,H-Yペプチド特異的にIFN-γを発現することから,同種免疫による抗腫瘍効果の担当細胞であった可能性がある.

Y-chromosome specific HLA-A2 is expressed in the HLA-Y chromosome. Male patients with chronic osteoblastic leukemia and acute leukemia after allogeneic bone transplantation due to HLA-consistent immunity (HLA-A2-positive), the patient's leukemia cells against high cell-damaging activity to show the origin of T cells to create.H-Y, the origin of dendritic cells to antigen prompt cells to use, the origin of T cells to stimulate, the establishment of cytotoxic T cells. These cytotoxic T cells show concentration-dependent cytotoxic activity against dendritic cells. In addition,HLA-A2-binding cytotoxic activity was demonstrated in leukemic cells from patients with leukemia and in male leukemic cells. In addition, the same group of male patients received retransplantation and maintained a high level of molecular genetic understanding during the period of bleeding. In addition, IFN γ production and T cell proliferation were indicators of H-Y selection and T cell proliferation. CD8 positive cells were isolated from the blood of patients, and IFN-γ positive cells were found in 6.8% of patients after 5-day stimulation. The CD8-positive IFN-γ-positive T cells were amplified by PCR in the CDR3 domain. As a result,BV22 was found to be able to induce cytotoxic T cells in vitro. The presence of H-Y cells in vitro and the formation of CD3 domains common to cytotoxic T cells in patients with bleeding are demonstrated. CD8-positive cells are present in the bleeds, and H-Y-specific IFN-γ expression is possible.

项目成果

Takami A, et al.: "Menatetrenone, a vitamin K2 analog, ameliorates cytopenia in patients with refractory anemia of myelodysplastic syndrome"Ann Hematol. 81・1. 16-19 (2002)

Takami A 等人：“Menatetrenone，一种维生素 K2 类似物，可改善骨髓增生异常综合征难治性贫血患者的血细胞减少症”Ann Hematol 81·1 (2002)。

Takami A, et al.: "Menatetrenone, avitamin K2 analog, ameliorates cytopenia in patients with refractory anemia of myelodysplastic syndrome"Ann Hematol. 81. 16-19 (2001)

Takami A 等人：“Menatetrenone，维生素 K2 类似物，可改善骨髓增生异常综合征难治性贫血患者的血细胞减少症”Ann Hematol。

Takami A, et al.: "Relapse of chronic myeloid leukemia(CML) in lymphoid crisis after allogeneic bone marrow transplantation for CML in chronic phase with busulfan plus cyclophosphamide regimen"Haematologica. (発表予定).

Takami A 等人：“采用白消安加环磷酰胺方案对慢性期 CML 进行同种异体骨髓移植后，淋巴危象中的慢性粒细胞白血病 (CML) 复发”（即将发表）。

高見昭良, 中尾眞二: "ミニ移植"医薬ジャーナル. 37. 1040-1046 (2001)

Akira Takami、Shinji Nakao：“微型移植”制药杂志 37. 1040-1046 (2001)。

高見昭良, 中尾眞二: "先端医療シリーズ13・腎臓病の最新医療"先端医療技術研究所. 5 (2001)

Akira Takami、Shinji Nakao：“先进医学系列 13：肾脏疾病的最新医学治疗” 先进医疗技术研究所 5 (2001)。