イヌ膵管組織片の熱可逆性ハイドロゲル内培養による膵内分泌細胞の新生について

通过在热可逆水凝胶中培养犬胰管组织来培养新一代胰腺内分泌细胞

• 批准号: 14770631
• 负责人: 磯貝 晶子
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770631/
• 关键词: 熱可逆性ハイドロゲル; 膵前駆細胞; 膵管組織片

ビーグル系雑犬の膵管のみを摘出し、その組織片(0.5mm^3)を熱可逆性ハイドロゲルポリマー(thermoreversible gelation polymer TGP)を用いて、三次元培養(4〜6週間)ついで二次元培養することにより、大きさ50μ前後の細胞集塊が形成された。この細胞集塊はsomato^+/insul^-/gluca^-で膵ラ島発生過程の一段階前の集団である。しかし、培養を継続しても膵ラ島様細胞集塊には分化誘導されなかった。そこで今年度はこのsomato^+/insul^-/gluca^-の細胞集塊をin vivo(自家移植)にて膵ラ島様細胞集塊に分化・誘導されるかどうかを検討した。これまでの方法により、膵管組織片より大きさ50μ前後のsomato^+/insul^-/gluca^-/の細胞集塊を形成させた。この細胞集塊500個前後を冷却10%TGP含有RPMI1640に入れ、ゲル化した後、膵管摘出したビーグル系雑犬の大網にpouchを作成し、その中に細胞集塊含有ゲルを自家移植した。自家移植後2週間目に大網を切除し、HE染色し、移植細胞集塊の形態学的変化を観察した。しかし、移植部位には細胞集塊は存在せず、繊維芽細胞、リンパ球を中心とする肉芽形成がみられるのみであった。ゲルは完全に消失していた。腹腔内温度が高い為か、ゲル内の水分が蒸発し、細胞集塊が生存できなかったと推定した。次いで、同様に細胞集塊含有ゲルを左右いずれかの腎被膜下に自家移植した。移植後2週目に腎摘出後、移植部位のHE染色し、形態学的変化を観察した。大網pouch内移植と同様、細胞集塊は存在せず、ゲルの一部がみられるのみであった。ゲル移植は不可能であり、細胞集塊のみの門脈内移植、又は脾内移植を検討する。

The ビーグル type 雑狗の膵duct のみを extracted し, その tissue piece (0.5mm^3) をthermally reversible gelation polymer TGP) is used for three-dimensional culture (between 4 and 6 weeks), two-dimensional culture, and large cell aggregation before and after 50 μ.このCell agglomerationはsomato^+/insul^-/gluca^-で膵ラ岛発生 Processの一step前の集団である.しかし, culture を継続しても赵ラshima 様 cell aggregation には differentiation induction されなかった.そこでThis year's はこのsomato^+/insul^-/gluca^-のcell aggregates をin vivo (self-transplantation) にて膵ラshima 様cell aggregates にdifferentiation and induction されるかどうかを検した.これまでのにより、Break canal tissue piece より大きさ50μ before and after のsomato^+/insul^-/gluca^-/のcell aggregation をformation させた.このCell agglomerate 500 pieces before and after cooling 10% TGP containing RPMI1640に入れ、ゲル化した后、赵duct Extracted from the したビーグル-type 雑狗の大网にpouchを made of したビーグル-type したビーグル-type しの中にcell aggregation containing ゲルをself-transplanted した. Two weeks after the transplantation at home, the morphological changes of the transplanted cell aggregates and the removal of the large mesh were examined by HE staining.しかし、There is a clump of cells at the transplanted site せず、Visillary bud cells、リンパspherical をcenter and とするGranulation formation がみられるのみであった.ゲルは completely disappeared していた. It is estimated that the temperature in the abdominal cavity is high, the water in the abdominal cavity is steamed, and the cell aggregation is alive. The cell agglomerates of sub- and homologous cells contain the subcapsular subcapsular kidney graft of the left and right kidneys. Two weeks after transplantation, HE staining and morphological changes of the transplanted site were observed after kidney removal. The transplantation within the large mesh pouch is the same as the existence of cell agglomerates and the existence of cell agglomerates. It is not possible to transplant the liver, it is impossible to transplant the cells in the portal vein, and it is impossible to transplant the cells in the spleen.

项目成果

Akiko Isogai: "Progenitor-Like Cells of Islets from Pancreatic Ductal Tissue Fragments in Three-Dimensional Culture System"European Surgical Reseach. 34・1. 71 (2002)

Akiko Isogai：“三维培养系统中胰管组织碎片的胰岛祖细胞”欧洲外科研究 34・1.71 (2002)。