プロサポシン関連ペプチドによる神経細胞のBcl-x_L発現促進作用

前塞波辛相关肽促进神经细胞中 Bcl-x_L 的表达

• 批准号: 14770715
• 负责人: 温 同春
• 金额: $ 1.66万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770715/
• 关键词: プロサポシン; スフィンゴ脂質水解酵素活性化タンパク; サポシンC; Bcl-x_L; プロサポシン関連ペプチド; 転写因子; STAT5; ルシフェラーゼ

プロサポシンはスフィンゴ脂質水解酵素活性化タンパク(サポシンA, B, C, D)の前駆体であるが、プロサポシンそのものは酵素活性化作用を示さない。しかし、最近になって、プロサポシンが神経栄養作用を有すること、ならびにその神経栄養活性中心がサポシンCの親水アミノ酸配列領域にある18-merペプチドであることが我々のin vivo及びin vitroの研究で明らかになってきた(J.Neurochem.,66,2197-2200,1996;Biochem.Biophys.Res.Commun.,204,994-1000,1994)。また、我々はこのプロサポシン関連18-merペプチド(以下18-MP)を、スナネズミの3分間一過性前脳虚血後3日目より投与しても、虚血後1ヶ月にわたる海馬CA1領域の緩徐な神経細胞死を抑止することを明らかにした(J.Cereb. Blood Flow Metab.,21,1295-1302,2001)。前記実験において、我々は3分間一過性前脳虚血負荷後1ヶ月にわたり緩徐に神経変性が進行する評価系をも確立した。さらに我々は、培養実験において18-MPが従来考えられていたよりはるかに低い細胞外液濃度域(1〜100fg/ml)で神経細胞の抗アポトーシス因子Bcl-x_Lの発現を促進し、強力に神経細胞を保護することを見出した(J.Cereb. Blood Flow Metab.,21,1295-1302,2001)。しかしながら、18-MPがいかなる転写因子の活性化を介して、Bcl-x_L発現を誘導するのか不明である。そこで、今年度の本研究では、ルシフェラーゼをレポータージーンとするプロモーターアッセイを実施し、18-MPにより活性化される転写因子を探索した。探索対象となる転写因子としては、AP1,CREB, E2F, HSE, Myc, NFAT, p53,SRE, STAT5,HIF-1などを選択した。目下の所、STAT5が転写因子の候補となり得るという予備実験結果を得ている。

プロサポシンはスフィンゴ Lipid hydrolase activated タンパク(サポシンA, B, C, D) の前槆体であるが、プロサポシンそのものはEnzyme activation function をshows さない.しかし, になって, プロサポシンが神経栄NUTRITIONAL ACTIVITY CenterがサポシンCのhydrophilic amino acid coordination fieldにある18-merペプチドであることが我々のin Research on vivo and in vitro (J. Neurochem., 66, 2197-2200, 1996; Biochem. Biophys. Res. Commun., 204, 994-1000, 1994).また、我々はこのプロサポシンrelated 18-merペプチド(hereinafter 18-MP)を、スナネズミの3 minutes after transient pre-eclampsia and blood deficiencyより出用しても, 1 month after asthenia, にわたる, hippocampal CA1 field, slow down, slow down the cell death, suppress する, ことを明らかにした (J.Cereb. Blood Flow Metab.,21,1295-1302,2001). Foreword 実験において, I 々は 3 minutes of transient pre-deficiency blood load, 1 month after 1 month of slow recovery, に神経変性が carried out and the evaluation system was established した.さらに我々は、Cultivation実験において18-MPが従卡えられていたよりはるかにLow extracellular fluid concentration range (1~100fg/ml) Bcl-x_L, an anti-cancer factor that promotes and protects cells, has a strong anti-cancer effect (J.Cereb. Blood Flow Metab.,21,1295-1302,2001).しかしながら, 18-MP がいかなる転WRriting factor のactivation をsuke して, Bcl-x_L 発appears をinduced するのかUnknown である.そこで、This year's research では、ルシフェラーゼをレポータージーンとするプロモーターアッセイを実士し, 18-MPによりactivationされる転WRITE FACTORをExplorationした. Explore the target となる転WRITE factors としては, AP1,CREB, E2F, HSE, Myc, NFAT, p53,SRE, STAT5,HIF-1などを选択した. The current place, STAT5 is written as a candidate for the factor, and the result is prepared.