ケロイド・肥厚性瘢痕における線維芽細胞アポトーシス発現とその病態解析

疤痕疙瘩和增生性疤痕中成纤维细胞凋亡的表达及其病理分析

• 批准号: 14770994
• 负责人: 岡田 恵美
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770994/
• 关键词: ケロイド; ケロイド線維芽細胞; アポトーシス; 肥厚性瘢痕; 耳垂ケロイド; 細胞増殖能; カスパーゼ3活性

ケロイドにおいてアポトーシス発現の意義を明らかにするため、アポトーシス実行分子である活性化カスパーゼの発現性を解析した。扁平瘢痕と比較しケロイドでは活性化カスパーゼ3と9の陽性線維芽細胞やTUNEL陽性アポトーシス細胞の有意な増加を示した。したがって、ケロイド線維芽細胞の一部では活性化カスパーゼ3と9を介したアポトーシス誘導が示唆された。さらに血清除去による培養ケロイド線維芽細胞(KF)のアポトーシス誘導実験では、血清除去3時間のKFでカスパーゼ9と3の誘導活性とHoechst陽性細胞アポトーシス細胞の有意な増加を認めた。この増加はカスパーゼ9阻害剤(LEHD-CHO)で有意に阻害され、カスパーゼ8阻害剤(IETD-CHO)で阻害されなかった。したがって、血清除去KFアポトーシス誘導機構に活性化したカスパーゼ9とその下位のカスパーゼ3の関与が明らかとなった。これより過剰に増殖したケロイド線維芽細胞の除去に活性化カスパーゼ3と9を介した細胞死誘導の関与が示唆された。また、ケロイドの生じる部位による差について比較検討を行った。耳垂ケロイドの細胞増殖動態を明らかにするため、他部位ケロイドとの比較検討から増殖期マーカーとアポトーシス発現性の解析を行った。アポトーシス発現の判定はTUNEL法と、Single-strandedDNAの免疫染色を用いた。細胞増殖能の判定には、PCNA(proliferating Cell Nuclear Antigen)と、Ki-67抗体についての免疫組織染色を行い、それぞれの陽性細胞数を計測し比較検討を行った。ケロイドでは、Ki-67、PCNA共に陽性細胞の発現性は高く、特に耳垂ケロイドで有意なKi-67の発現性の増加を認めた。他部位ケロイドにおける細胞増殖能の低下は術前の保存的治療効果の関与も考えられるが、耳垂ケロイドと他部位に発生するケロイドとは、その性状が分子レベルやその他で異なるとの見解も従来報告されており、詳細な解明には今後更なる検討を要すと思われた。アポトーシスに関しては、TUNEL法、ssDNA共に陽性率は低く、耳垂以外のケロイドにて増加傾向を示すものの、耳垂と他部位ケロイドにおける有意差は認めなかった。

The significance of the development of the new technology is analyzed in detail. Compared with the flat scar, the positive line of TUNEL cells increased significantly. A part of the cells in the cell line were activated and the cells were induced by the enzyme. In addition, serum removal was performed on cultured kf cells, and the induction of kf cells was performed on kf cells for 3 days. This increase is due to the intentional damage caused by LEHD-CHO, and the intentional damage caused by IETD-CHO. In addition, the serum can be removed by activating the mechanism. This is the first time that we've seen this. A comparison study is conducted between the two groups. The analysis of cell growth dynamics in earlobe and other parts of the ear TUNEL and single-stranded DNA immunostaining were used to determine the presence of DNA. Cell proliferation ability determination, PCNA(proliferating Cell Nuclear Antigen), Ki-67 antibody detection, immunologic staining, cell count, and comparative analysis were performed. The expression of Ki-67 and PCNA co-positive cells was significantly higher than that of normal cells. The relationship between the treatment effect of pre-operative preservation and the decrease of cell proliferation activity in other parts of the ear lobe, the development of earlobe and other parts of the ear lobe, and the observation of molecular changes and other differences in characteristics of the ear lobe are reported in this paper. Detailed explanation is needed for further discussion. The positive rate of ssDNA was low by TUNEL method, and the positive rate of ssDNA was increased by TUNEL method.

项目成果

耳垂ケロイドにおける細胞増殖性の検討

耳垂瘢痕疙瘩细胞增殖的检查

• 发表时间: 2005
• 期刊: 第10回ケロイド・肥厚性瘢痕研究会記録集 10
• 作者: Yuko Sugie;他9名;今泉 りさ
• 通讯作者: 今泉 りさ

岡田 恵美: "ケロイドと肥厚性瘢痕におけるアポトーシス発現"ケロイド・肥厚性瘢痕研究会. 7. 42-45 (2001)

Emi Okada：“疤痕疙瘩和肥厚性疤痕中的细胞凋亡表达”疤痕疙瘩和肥厚性疤痕研究组。7. 42-45 (2001)。