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唾液腺に発現するオステオポンチンの組織構築における役割と生理的意義

唾液腺表达的骨桥蛋白在组织结构中的作用和生理意义

基本信息

批准号：
14771028
负责人：
太田一正
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Tokyo Dental College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

我々はマウス唾液腺にオステオポンチン(OPN)が発現していることを見出した。そこで、本研究では唾液腺の組織・機能の構築におけるOPNの役割を明らかにすることを目的とし、自己免疫疾患モデルマウスを用いて、野生型マウスでみられた加齢に伴うOPN mRNAの発現上昇が舌下腺と顎下腺で抑制されたこと、顎下腺ではOPNタンパクの発現量が増加し、プロセッシングを受けたと考えられる30kDaフラグメントが減少したことを明らかにしてきた。本年度はマウス唾液腺OPNの小分子(30kDaフラグメント)生成がMMP作用によるものか、またそのフラグメントの性状を解析するためその単離を試みた。30kDaフラグメントのOPNタンパクの一部分であるかを明らかにするため、組換えOPNタンパクを基質として、活性型MMP-7あるいは顎下腺ホモジネートと反応させたが、用いた実験条件下では、いずれの場合にも30kDaフラグメントや、その他の抗OPN抗体陽性フラグメントは検出されなかった。また、舌下腺ホモジネートを基質とした場合もまた、限定分解されたOPNタンパクのフラグメントは検出されなかった。おそらくMMPでの切断には組替えOPNタンパクにはない糖鎖の付加やリン酸化が必要であること、また、唾液腺抽出液中にMMPの活性抑制にかかわる分子が存在することが示唆された。30kDaフラグメンの性状をアミノ酸配列の決定から明らかにするため、プロテインGを用いた免疫沈降法により単離を試みたが精製できなかった。2次元電気泳動法により唾液腺抽出タンパクから30kDaフラグメントをシングルスポットとして分離することができたが、アミノ酸配列の決定には至らなかった。

I'm a salivary gland にオステオポンチン(OPN)が発成していることを见出した.そこで、This study is about the structure and function of salivary glands. Purpose, autoimmune disease モデルマウスを Use いて, wild type マウスでみられたplus 齢に合うOPN The expression of mRNA is increased in the sublingual gland and the submandibular gland and the amount of the submandibular gland is increased. , プロセッシングをReceived けたと卡えられる30kDa フラグメントがreduce したことを明らかにしてきた. This year's salivary gland OPN small molecule (30kDa フラグメント) produced MMP Use the によるものか, またそのフラグメントのcharacter を to analyze the するためその単leave test みた. 30kDa フラグメントのOPN タンパクのpart of であるかを明らかにするため, group replacement OPN タンパクを matrix として, active MMP-7 あるいはsubmandibular gland ホモジネートと Reflection させたが, use いた実験 condition では, いずれの occasion にも30kDaフラグメントや, そのののanti-OPN antibody positive フラグメントは検出されなかった.また、sublingual gland ホモジネートをstromal としたoccasion もまた、limited points Solution to the problem of OPN's problem.おそらくMMP cut off には group replacement えOPN タンパクにはないsugar lock のpay plus やリン acidification がであるThe presence of こと, また, and にMMP activity-inhibiting molecules in salivary gland aspirates indicates the presence of することが. 30kDa フラグメンのcharacteristicsをアミノacid coordination decisionから明らかにするため,プロテインGを Used the immunosedimentation method to test the みたが refined できなかった. 2D Electrophoresis Method Salivary Gland Extraction System 30kDa Fluidルスポットとしてすることができたが, アミノacid arrangement のdetermination には to らなかった.