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小腸上皮細胞による食事性抗原輸送と取り込みに及ぼす炎症性サイトカインの影響

炎症细胞因子对饮食抗原转运和小肠上皮细胞摄取的影响

基本信息

批准号：
14780077
负责人：
神田知子
金额：
$ 1.73万
依托单位：
Yamaguchi Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

小腸上皮細胞細胞における外来性抗原処理過程では,抗原の取り込みに続く細胞内での抗原プロセシングが重要である.しかしながら,小腸上皮細胞における外来性抗原のプロセシングやそれに関与するプロテアーゼ等は詳細に検討されていない.またasparitc proteaseは抗原提示細胞において重要な役割を果すことが知られている.そこで本研究は小腸上皮細胞様に分化するヒト大腸腺癌由来細胞株Caco-2を用いて,卵白アレルゲンであるオボアルブミン(OVA)の粘膜透過性やプロセシングにおける,aspartic proteaseの影響を,その阻害剤であるpepstatin Aを用いて検討した.1.Caco-2細胞lysateによるOVAプロセシングへの影響Caco-2細胞のlysateとOVAをpepstatin Aの存在下でin vitroによるインキュベートを行い,分解の程度をwestern blottingにて検出した.Caco-2細胞lysateとインキュベートすることでOVAはいくつかのペプチド断片に分解されたが,pepstatin Aの存在下では分解の程度が抑制された.2.粘膜透過性への影響コラーゲンコートした透過性のある膜上で培養したCaco-2細胞に,pepstatin Aを2時間添加した後,OVAの上端側から基底膜側への移行量をELISA法にて測定した.Pepstatin Aを添加した群ではOVAの通過量が減少し,粘膜通過を抑制することが示された.以上より,Caco-2細胞における外来性抗原の処理機構において,asparitc proteaseが抗原のプロセシングや輸送に関与し,抗原ペプチドの生成や抗原提示過程で重要な役割を果していることが示唆された.炎症性サイトカイン存在下でのaspartic protease阻害剤の影響についてはさらに検討を進める余地があり,今後の検討課題である.

The process of exogenous antigen processing in intestinal epithelial cells is very important. In addition, the foreign antigen in small intestinal epithelial cells was discussed in detail. The asparitc protein is an antigen that indicates the importance of cell culture. In this study, we investigated the effects of apoptotic protease on the mucosal permeability of small intestine epithelial cell line Caco-2, which is derived from colorectal adenocarcinoma. 1. Effects of OVA on Caco-2 cell lysate in the presence of pepstatin A in vitro Caco-2 cell lysate and pepstatin A were isolated from Caco-2 cells by western blotting. In the presence of pepstatin A, the decomposition of Caco-2 cells was inhibited. The amount of migration from the basal membrane to the upper end of the OVA was measured by ELISA.Pepstatin A was added to reduce the amount of migration from the basal membrane to the upper end of the OVA. In the above,Caco-2 cells are involved in the mechanism of exogenous antigen processing, and asparitc protease is involved in the process of antigen selection and delivery. There is room for further research on the influence of apoptotic protease inhibitors in the presence of inflammatory enzymes.