大気環境における塩素化多環芳香族炭化水素の動態解析ならびに生態影響評価

大气环境中氯化多环芳烃动态分析及生态影响评价

基本信息

批准号：
14780416
负责人：
大浦健
金额：
$ 2.5万
依托单位：
University of Shizuoka
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では塩素化多環芳香族炭化水素類(Cl-PAHs)の生態影響評価として、Cl-PAHsにおける内分泌かく乱作用ならびに変異原性について検討した。測定には3〜5環系からなる19種類のCl-PAHを用いた。内分泌かく乱作用の評価システムとしては、ヒト由来のダイオキシンレセプター(AhR)遺伝子を組み込んだ酵母を用いて、試験物質の受容体結合能ならびにDNA転写活性化能をレポーター遺伝子であるβ-ガラクトシダーゼ活性により測定する方法を用いた。また、酵母two-hybrid法によるエストロゲン(ER)活性についても評価した。変異原性試験は、SOS反応を利用したumu-testにより評価した。はじめに、これらの評価を行うにあたり、簡便かつ小規模で評価できる分析操作について検討した。その結果、マイクロプレートリーダーを用いてマイクロプレート上で簡便かつ定量的に測定できる方法を確立した。AhR結合能試験においては、いずれのCl-PAHにおいてもβ-ガラクトシダーゼ活性を検出することができ、その値は濃度依存的に増加することがわかった。とくに、3,8-ジクロロフルオランテンや6-クロロクリセンではBaP以上の活性を有していた。よって、Cl-PAHは生体内に取り込まれた際、内分泌攪乱作用を引き起こす可能性を初めて明らかにすることができた。一方、ER活性においては、いずれのCl-PAHにおいても結合能を示さなかったことから、Cl-PAHsはダイオキシン類と類似した生体反応を示すことが推測された。また、Cl-PAHsは、S9存在下で変異原性を示したが、S9非存在下では変異原性を示さなかった。このことから、Cl-PAHsは直接変異原性を有しておらず、代謝されることによって変異原性が誘発することが示唆された。

在这项研究中，我们研究了CL-PAHS的内分泌破坏作用和诱变，以评估氯化多环芳族烃（CL-PAH）的生态效应。为了进行测量，使用了19种由3-5个环系统组成的CL-PAH。作为评估内分泌干扰作用的系统，使用了一种方法，其中使用β-半乳糖苷酶活性（记者基因）测量了融合了人类衍生的二恶英受体（AHR）基因的酵母，并激活测试物质的DNA转录的能力。还评估了通过酵母两杂化方法的雌激素（ER）活性。使用SOS响应通过UMU检验评估诱变性测试。首先，在进行这些评估时，我们检查了可以简单且小规模评估的分析操作。结果，已经建立了使用微板读取器对微孔板进行简单和定量测量的方法。在AHR结合能力测试中，可以在任何CL-PAH中检测到β-半乳糖苷酶活性，其值以浓度依赖性方式增加。特别是，3,8-二氯氟氨基和6-氯烯烯的活性高于BAP。因此，首次有可能阐明Cl-PAH在体内受到时会引起内分泌干扰效应的可能性。另一方面，就ER活性而言，在任何CL-PAH中均未显示结合能力，并且猜测Cl-PAHs表现出与二恶英相似的生物学反应。此外，在存在S9的情况下，CL-PAH显示出诱变性，但在没有S9的情况下没有诱变。这表明CL-PAH没有直接的诱变性，并且在代谢时会诱导诱变。