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海岸マツ林生態系の環境修復をめざした樹木共生菌の探索とその機能解析

探索树木共生细菌并分析其对沿海松林生态系统环境恢复的功能

基本信息

批准号：
14760097
负责人：
松田陽介
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Mie University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでに外生菌根菌(以下、菌根菌)の培養実験を通して塩類耐性菌の選抜を行なってきた。しかし、一般に特定の環境下で有効とされる菌根菌を接種した場合でも野外ではその効果がみられない場合がある。それは接種した菌が、土着菌によって駆逐されてしまうためと考えられている。したがって、本年度は海岸地域に生息する菌根菌を明らかにするため、天然に更新したクロマツ実生苗に着目して、その根系に形成された外生菌根の形態的、分子生物学的類別を行なった。三重県河芸町の海岸クロマツ林(30×550m)内の12ヶ所から、当年生クロマツ実生(以下、当年生実生)を15個体と1年生以上のクロマツ実生(以下、1年生実生)を14個体それぞれ採取した。それらは顕微鏡観察とDNA解析に用いた。実生を地際で切断後、地上部は105℃24時間乾燥させた後に重量測定を行なった。地下部に形成された外生菌根は実体、光学顕微鏡を用いて観察し、菌鞘表面の菌糸配列組織、クランプの有無などにもとづき形態タイプに類別した。さらに各形態タイプはrDNAのITS領域を対象としたPCR-RFLP解析を行ないRFLPタイプに類別した。その結果、当年生、1年生実生からはそれぞれ11タイプ、15タイプに類別され、合計15タイプの形態タイプが識別された。そのうち、菌根の色や菌鞘表面構造からCenococcum geophilumが定着菌と同定され、その他に未同定担子菌類、チチタケ属菌の感染が推察された。類別した形態タイプは、ITS-RFLP解析によって合計13RFLPタイプに識別された。当年生と一年生実生の1個体の根系に形成された菌根のタイプ数は,それぞれ2.5±0.9,3.4±0.8であった。実生の齢に関わらずRFLPタイプ13かRFLPタイプ3の菌根数、実生への出現頻度が高かった。クロマツ実生地上部の乾燥重量は,全菌根数と強い正の相関関係が認められたが(r=0.865,p<0.001)、タイプ数との間には相関は認められなかった(r=0.167,p=0.385)。

The culture of ectomycorrhizal fungi (hereinafter, mycorrhizal fungi) was carried out through the selection of resistant fungi. In general, there are mycorrhizal fungi inoculated in certain environments, and in the wild, there are mycorrhizal fungi inoculated in certain environments. It's a good idea to inoculate bacteria, indigenous bacteria, etc. This year, ectomycorrhizal fungi live in coastal areas, naturally regenerate seedlings, and form ectomycorrhizal morphology. In the coastal forest (30×550m) of Mie Kawamachi, there are 12 trees, 15 trees, and 14 trees. Microscopic analysis of DNA After the ground is cut, the ground is dried at 105℃ for 24 hours, and the weight is measured. The ectomycorrhizal fungi formed in the underground part were observed by optical microscope, and the bacterial organization on the surface of the sheath was observed. PCR-RFLP analysis was performed to identify the types of rDNA in the ITS domain. The results, the current year, the first year of life, the total of 11 categories, 15 categories, and the total of 15 categories are identified. The surface structure of mycorrhizal sheath and mycorrhizal sheath of Cenococcus geophilum were investigated. The total number of RFLP fragments identified by ITS-RFLP analysis was 13. The number of mycorrhizal roots formed in one individual of the year was 2.5± 0.9 and 3.4 ±0.8 respectively. The number of mycorrhizal fungi and the frequency of occurrence of mycorrhizal fungi were higher than those of RFLP. There was a positive correlation between total mycorrhizal number and dry weight of shoot (r= 0.865, p <0.001), and a negative correlation between total mycorrhizal number and dry weight of shoot (r= 0.167, p =0.385).