遺伝子改変動物を用いた新しいpreconditioning誘導因子の解明

使用转基因动物阐明新的预处理诱导剂

• 批准号: 14770035
• 负责人: 岩田 和実
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770035/
• 关键词: アルドース還元酵素; 虚血再灌流; preconditioning; 心臓; 遺伝子改変動物; Aldose reductase; Preconditioning; 心筋梗塞; Reactive oxygen species

1)Cre-loxP系を用いた心筋特異的aldose reductase (AR)遺伝子ノックアウトマウスの作製ARの活性部位を構成する第2,第3エクソンを含む1.7kbを標的部位とし,選別マーカーとしてneo耐性遺伝子を用いたloxPターゲッティングベクターをES細胞にトランスフェクトし,相同組換え体の分離に成功した.ES細胞を集合キメラ法によりマウス初期胚に導入し,キメラマウスを得た.ES細胞由来の変異遺伝子が生殖系列に入ったマウスより変異遺伝子のヘテロ接合体得る段階まで来ている.2)PreconditioningにおけるARの関与PreconditioningにおけるARの役割を明らかにするために,まず急性虚血再灌流障害におけるARの関与を検討した.マウス摘出心をランゲンドルフ法により灌流し30分間の全虚血後60分間の再灌流負荷を行った.心機能は圧トランスデューサーに連結したバルーンを左心室内に挿入することにより測定し,心筋細胞の傷害は灌流液中へのクレアチンキナーゼの漏出を指標とした.野生型マウスにおいてAR阻害剤の虚血再灌流障害に対する効果を検討したところ,心機能および心筋傷害が未処置群と比較し有意な改善作用が認められた.ARを高発現するトランスジェニックマウス(TG)では再灌流時の心機能および心筋細胞傷害が同腹のlittermateと比較して有意に増悪した.またTGで認められた増悪はAR阻害剤およびソルビトール脱水酵素阻害剤により有意に改善された.このことからARは急性の心虚血再灌流障害において増悪効果を有することが明らかとなった.現在Preconditioningを誘導したマウスの心臓におけるARの発現変化および阻害剤の効果について検討中である.

1) Cre-loxP system uses aldose reductase specific for cardiomyocytes. (AR) 缝子ノックアウトマウスのproduced ARのactive partをConstitutionする 2nd, 3rd エクソンをContains 1 .7kb The target part is とし, select the マーカーとしてneo patience left 伝子を用いたloxPターゲッティンES cells are separated, and the same group is separated and separated successfully. ES cells are assembled.メラ法によりマウスInitial embryo introductionし,キメララマウスをgetた.ES cell originの変differential inheritanceががreproductive series Preconditi oningにおけるARの关 and PreconditioningにおけるARのservice cutを明らかにするために,まずAcute ischemic reperfusion disorder におけるARの关与を検した.マウス用心をランゲンドルフ法によりperfusionし30 minutes of total blood deficiency and 60 minutes of reperfusion loadを行った.cardiac functionは圧トランスデューThe connection between the left ventricle and the left ventricle was measured, and the damage to the myocardial cells was measured in the perfusate.クレアチンキナーゼの Leakage indicator とした. Wild type マウスにおいてAR obstruction 剤のblood deficiency reperfusion obstruction に対する Effect を検To したところ, Psychiatric Function およびPsychocardial Injury が Untreated Group と Comparison し Intentional な Improvement Effect が cognizance められた.ARを高発成するトランスジェニックマウス(TG)ではcardiac function during reperfusionおよびcardiac myocardial cell injury Harm が Same belly の littermate と comparison し て intentional に Increase 悪 し た. ま TG で cognizance め ら れ た 嗂 は AR resistance Hazardous enzyme dehydration enzyme inhibitor Hazardous enzyme inhibitor Hazardous enzyme inhibitor Hazardous enzyme inhibitor Hazardous enzyme inhibitor Hazardous enzyme inhibitor Hazardous enzyme to improve the heart rate The effect of blood reperfusion impairment has increased. Preconditioni ngをinducing したマウスの心臓におけるARの発成剉化および hindering 剤のeffect について検同中である.