慢性関節リウマチ滑膜の遺伝子発現制御による治療の基礎的検討

调节类风湿性关节炎滑膜基因表达治疗的基础研究

• 批准号: 14770209
• 负责人: 山口 晃弘
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770209/
• 关键词: 関節リウマチ; 滑膜; FRP; 遺伝子多型; FosB

我々は関節リウマチ(RA)の滑膜組織において、differential display法によりfollistatin related protein(FRP)の遺伝子発現が亢進していることを見いだした。FRPはRAの自己抗原の一つとして報告されている蛋白であり、follistatinとの相同性から抑制型の機能が推測された。1.RA11例と変形性関節症5例の滑膜組織におけるFRPの発現をreal-time PCRにて再検討した。結果、RAにおいて平均17倍のFRP発現亢進が確認された。2.FRP発現ベクターを作成した。RA-FLS由来の不死化細胞株E11を用いてFRPを強制発現させ、細胞増殖を定量した。結果、得られたFRP発現クローン2個についてのRT-PCRではFRP発現が、それぞれ1.5倍および2.6倍に増加しており、細胞増殖は0.83倍、0.67倍に低下していた。RA-FLSにおいて、FRPは発現量依存性に細胞増殖を抑制すると考えられた。RA関節において、FRPは滑膜の増殖抑制作用を持ち、RAの治療応用の可能性が示唆された。3.FRP遺伝子の多型とRAの発症、病態との関連の有無を検討した。FRP遺伝子の全翻訳領域と、プロモーター領域約1.6kbにわたる変異スクリーニングでは、プロモーター領域、翻訳領域、エクソンで計16箇所の変異が検出された。多型に該当する変異で、翻訳領域の3箇所と非翻訳領域の4箇所について、RA 224例、健常対照者220例の遺伝子型を決定した。しかし統計的にRAとの有意な関連は無かった。RA滑膜における顕著なFRP産生亢進は、FRP遺伝子自身の多型によるものではなく、他の因子によりFRPの転写が制御されていることが示唆された。

The synovial tissue of RA was developed by differential display method, and the expression of FRP was enhanced. FRPs report the identity of their own antigens, follistatin, and inhibitory function. 1.11 RA cases and 5 RA cases were diagnosed by real-time PCR. The results showed that the average 17-fold increase in FRP emission was confirmed. 2. FRP is created. RA-FLS is derived from an immortal cell line E11 and is used to quantify cell proliferation and stress development. The results showed that FRP detection increased by 1.5 times and 2.6 times respectively, and cell proliferation decreased by 0.83 times and 0.67 times respectively. RA-FLS, FRP and production capacity dependence of cell proliferation inhibition RA joint tissue, FRP synovium proliferation inhibition effect, RA treatment of the possibility of this study. 3. The polymorphism of FRP gene and the presence or absence of RA disease and association were discussed. The FRP gene has a total of 16 different genes in the domain of translation and translation, about 1.6 kb in size. There were 3 sites in the multi-type, 4 sites in the inverted domain, 224 sites in the RA domain, and 220 sites in the normal domain. The statistical significance of RA is not obvious. RA synovium is produced by FRP, FRP gene itself is produced by FRP gene, and other factors are produced by FRP gene