モデル動物を用いた伸長ポリグルタミン鎖がCREB依存性転写活性化に及ぼす効果

使用模型动物延长聚谷氨酰胺链对 CREB ​​依赖性转录激活的影响

• 批准号: 14770285
• 负责人: 小宅 睦郎
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14770285/
• 关键词: モデル動物; ボリグルタミン病; 歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症; CREB依存性転写; ポリグルタミン病; 脊髄小脳変性症; モデルマウス; CREB転写; TAFII130

(1)研究の背景と目的我々はポリグルタミン病の一つである歯状核赤核淡蒼球ルイ体萎縮症(DRPLA:dentatorubralpallidolysianatrophy)を題材にその病態機序に関する研究を進めてきた。我々は培養細胞を用いた一過性発現系において、伸長ポリグルタミン鎖を有する変異蛋白と転写コアクチベーターであるTAF_<II>130が結合し、CREB依存性の転写活性化を抑制することを明らかにした。このCREB依存性の転写活性化の障害により特定のcAMP応答遺伝子群の発現が抑制されることが推測され、その結果神経細胞の機能不全から細胞死に結びついていくとの仮説を考えた。この仮説をモデル動物を用いた個体レベルの脳で検証するため本研究を行った。具体的には(1)cAMP応答配列(cAMP response elemnet:CRE)下にレポーター遺伝子としてβ galactosidase遺伝子を発現するトランスジェニックマウスとDRPLAトランスジェニックマウスとの交配によりダブルトランスジェニックマウスを作成し、レポーター遺伝子の活性を測定することで簡便かつ迅速にCREB依存性転写活性化への効果を検討した(2)結果と考察(1)現在我々の研究室で系統樹立した76グルタミン(Q76)と有するDRPLAトランスジェニックマウスと、Washington大学より供与されたtandemにCRE配列が6つ並んだ下流にβ-galactosidaseを発現するトランスジェニックマウスを交配し、ダブルトランスジェニックマウスを系統樹立した。(2)これらのダブルトランスジェニックマウスと対照としてCRE-β galactosidase単独のTGを用いて検索した。CREB依存性の転写を賦活する条件として一過性に痙攣刺激を与え、マウス脳の様々な部位にてβ galactosidase陽性細胞の有無、分布につき比較した。(3)その結果ダブルトランスジェニックマウス脳において、β galactosidase遺伝子の発現が低下していることが明らかになった。この結果は培養細胞での一過性発現系のみでなく、哺乳類の脳においても伸長ポリグルタミン鎖存在下においてCREB転写が実際に阻害されることを示したものとして重要と考えられた。

(1)Background and Objective: To study the pathological mechanism of dentatorular pallidolytrophy (DRPLA). In this study, we found that the expression of TAF_130 in cultured cells was inhibited by binding to CREB-dependent transcription activity.<II>This CREB-dependent inhibition of transcription activation inhibits the development of specific cAMP receptor subgroups, which is presumed to result in dysfunction of neurons and cell death. This study was conducted on the basis of the results of the study. Specific (1) cAMP response (cAMP response elemnet: CRE) under the (2) The results of the investigation (1) The systematic establishment of CREB-dependent gene activity assay system in our laboratory (Q76) DRPLA, University of Washington CRE, University of Washington CRE The first time I saw it, I was thinking about it. (2)The CRE-β galactosidase gene is used in the detection of TG. CREB-dependent transcription is activated by transient spasmodic stimuli, and the presence and distribution of β-galactosidase positive cells are compared. (3)As a result, the development of β galactosidase gene was reduced. The results show that the transient development of cell culture is very important in mammals.