β-セクレターゼ調節因子の単離と機能解析

β-分泌酶调节因子的分离及功能分析

• 批准号: 14780570
• 负责人: 亀高 諭
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780570/
• 关键词: アルツハイマー病; 脳神経疾患; セクレターゼ; プロテアーゼ; 蛋白質輸送; BACE; ホスホリピド

APPのプロセシングの分子機構及びその調節機構を明らかにする目的でβ-セクレターゼ(BACE)の性状解析を行ってきた。培養細胞に発現させたBACEはTGN、エンドソーム、細胞膜に局在し、これらのポストゴルジコンパートメントへのBACEの局在化には24アミノ酸からなる細胞質ドメイン(BACE-Tail)が不可欠であることが知られている。BACEの細胞内局在化機構を明らかにする目的でこれらの領域と結合する蛋白質を探索した結果、phospholipid scramblase1(PLSCR1)を同定し、両蛋白質の相互作用について詳細に検討した結果、PLSCR1との結合にはBACE-tail内のジロイシン配列(LL)が必須である事が明らかとなった。細胞生物学的手法、及び細胞内におけるコレステロール輸送の阻害剤を用いた解析により、PLSCR1がBACEと共通の輸送経路を通って細胞内で輸送されている事、更に両蛋白質が細胞内でラフトと呼ばれる膜脂質の微小ドメインに存在し、細胞内で蛋白質複合体を形成している事を明らかにした。近年、試験管内結合実験により、BACE-tailがアダプター蛋白の一種であるGGA1及びGGA2と直接的に結合する事が報告された。GGAはクラスリン被覆小胞の形成に関与するsmall GTPaseであるARF(ADP-ribosylation factor)依存的にTGNからの蛋白質輸送に関わる事が知られている。我々はBACE-tail及びGGA1が直接的に結合するだけでなく、その親和性がBACE-tailのセリン残基のリン酸化により変化することを見い出した。BACE-tailのリン酸化はBACEの細胞内輸送の調節に関わっている事が示唆されており、BACEの細胞内輸送の調節機構としてBACE-tailのリン酸化が重要な役割を担っている可能性が示唆された。

The molecular and molecular organs of APP were used to analyze the characteristics of β-phenotypic acid (BACE). The BACE TGN, the cell membrane, the cell membrane, the cell It is necessary for BACE to verify the results of protein binding in the field of chemical engineering, phospholipid scramblase1 (PLSCR1) homology, protein interaction, and BACE-tail in combination with PLSCR1. The methods of cellular biology, the methods of cellular biology, and the combination of intracellular proteins, intracellular lipid, membrane lipids, intracellular lipid, membrane lipids, proteins, lipid, lipid, protein, lipid, protein, lipid In recent years, in the tube, the combination of BACE-tail protein, GGA1 and GGA2 has been directly combined with the report of the incident. GGA is responsible for the formation of small cells that are dependent on the ARF (ADP-ribosylation factor) of small GTPase cells. We use the direct combination of BACE-tail and GGA1 to determine whether or not the residue is acidified or acidified by the combination of molecular weight, BACE-tail, and molecular weight. BACE-tail acidify the BACE. The intracellular transport of the BACE-tail and the BACE indicates the possibility of the acidification of the important service cutting equipment.

项目成果

Satoshi Kametaka: "Identification of phospholipid scramblase 1 as a novel interacting molecule with β-secretase (BACE)"The Journal of Biochemistry. (in press). (2003)

Satoshi Kametaka：“磷脂扰乱酶 1 与 β-分泌酶 (BACE) 的新型相互作用分子的鉴定”《生物化学杂志》（2003 年出版）。