DNA担持ナノ粒子による遺伝子の一塩基変異識別の機構解明

使用负载 DNA 的纳米颗粒识别基因中单核苷酸突变的机制

• 批准号: 14780641
• 负责人: 宝田 徹
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research (2003)Kyushu University (2002)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780641/
• 关键词: ナノ粒子; 遺伝子診断; 一塩基多型; コロイド; 塩析

申請者らはこれまでに、一本鎖DNAを表面に担持した高分子コロイド粒子(DNA担持ナノ粒子)の自己組織化構築法を報告している。さらに、このナノ粒子の分散液に相補鎖DNAを添加して粒子表面上で二重鎖を形成させると、DNA担持ナノ粒子の塩に対する安定性が著しく低下することを見出している。そして、この実験事実こそが、このDNA担持ナノ粒子を用いた一塩基変異検出法の測定原理であることが種々の検討から明らかになった。そこで本研究では「粒子表面での二重鎖形成が凝集開始塩濃度の低下を誘起する」という測定原理のメカニズムを明らかにすることを目的とした。昨年度では主に、DNA二重鎖を安定化する添加剤、すなわち種々のカチオン(アルカリ金属およびアルカリ土類金属、希土類金属など)の影響について詳細に検討した。本年度では、逆にDNA自体を化学修飾することによって、どのような凝集挙動の変化が生じるかについて焦点を絞った。具体的には、主鎖に電荷を有しない核酸類縁体であるペプチド核酸(PNA)をサンプルDNAの代わりに使用した。PNAは天然核酸以上に熱安定性の高い二重鎖(PNA-DNA)を形成することが知られている。一本鎖PNAをDNA担持ナノ粒子の分散液に添加して塩析を行ったところ、天然の一本鎖DNAを加えた場合よりも著しく凝集開始塩濃度が低下した。これは昨年度の結果で示唆された電荷中和のみが凝集の原因ではなく、二重鎖形成による鎖の剛直性の向上も原因の1つであることを強く示唆している。以上の結果より、DNA担持ナノ粒子の二重鎖形成による分散安定性の低下の原因は、電荷密度の低下と剛直性の上昇であることが明らかになった。

The applicant is responsible for the preparation of high molecular weight particles (DNA particles), and the DNA surface is responsible for the chemical composition of the report. Particles, particles, dispersions, DNA, add particles, double on the surface of particles, form particles, DNA is responsible for particles, particles, stability, stability, low, low, In order to determine the principle of the determination of different kinds of particles, the DNA is responsible for the determination of the particles in the system. In this study, the formation of a double agglutination on the surface of particles begins at the beginning of a low temperature. The principle of the determination of the surface of the particles shows that there is a significant difference in the purpose of the test. Last year, the main project, the DNA double-duty stabilization system, the addition of several kinds of metal materials, the production of rare earth metals and rare earth metals, has a significant impact on the production of earth metals. This year, DNA autologous chemical therapy, chemical therapy, coagulation, agglutination, chemistry, chemistry The specific and primary electronic charges are linked to nucleic acids, such as nucleic acids, nucleic acids (PNA), nucleic acids, and DNA. PNA natural nucleic acid above, stability, high-level duality (PNA-DNA), the formation of natural nucleic acid, the knowledge of natural nucleic acid, the stability, the stability, the high-level duality (PNA-DNA). A PNA DNA is used to analyze the particles and disperse liquids, and a natural DNA is used to determine the starting point of agglutination. The results of last year's results showed that the cause of agglutination was caused by neutralization and agglutination, and that the cause of agglutination was stronger than that of cause 1. The above results show that DNA is responsible for the duality of particles to form the cause of low dispersion stability, low charge density, high straightness, low load density, low dispersion stability, low charge density, low load density, low charge density, low

项目成果

宝田: "遺伝子を塩で見分ける"現代化学. No.4(印刷中). (2003)

Takarada：“用盐区分基因”，《现代化学》第 4 期（出版中）。

宝田ら: "遺伝子を塩で見分ける"現代化学. No.4. 36-41 (2003)

Takarada 等人：“用盐鉴定基因”现代化学第 4 期 36-41（2003 年）。