培養細胞シートを利用した再生組織への血管新生を誘導する環境因子の基礎的検討

利用培养细胞片层诱导再生组织血管生成的环境因素的基础研究

• 批准号: 14780654
• 负责人: 播元 政美
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780654/
• 关键词: 細胞シート; 生体応答; 血管誘導

ヒト大動脈血管内皮細胞、ヒト臍帯静脈血管内皮細胞、ウシ大動脈血管内皮細胞、ヒト肺線維芽細胞、ヒト大動脈血管平滑筋細胞、ラット心筋細胞、ラット肝実質細胞などからなる細胞シートを得るため温度応答性培養皿を適用した。どの細胞においても本培養表面から低温処理で細胞シートが回収された。これらの細胞シートのヌードラット皮下への導入による生着性、周囲組織の変化などについて経時的に観察した。導入3日後、7日後、14日後のいずれにおいても導入した部位に細胞シートが残っている様子が観察された。細胞シート導入部近くには血管が周囲より多く存在した。同一個体の細胞シート導入部位の切開のみでは観察されない現象であることから、本結果は細胞シートの導入による生体の応答性であると、考えられた。さらに細胞シート条件による血管誘導作用の差異を検討するため、線維芽細胞シート、血管内皮細胞シートを用い、各々単層および二重層で導入した場合の現象を、組織切片(断層方向)のHE染色像およびAzan染色像より比較した。単層よりも二重層、さらに線維芽細胞シートよりも血管内皮細胞シートで導入部周囲組織中に多くの血球が認められる傾向があった。重層化共培養組織(心筋細胞シート/血管内皮細胞シート、平滑筋細胞シート/血管内皮細胞シート、肝細胞シート/血管内皮細胞シートなど)についても皮下組織への導入が可能であり、導入7日後においても細胞シートが残っている様子が確認された。単層で導入した細胞シート同様に、シート導入部位周辺で血管様組織が多く認められた。同一個体に導入した平滑筋細胞シート/血管内皮細胞シートと肝細胞シート/血管内皮細胞シートとの比較では、前者に細かい血管が数多く認められるのに対し、後者では比較的少ない傾向が観察された。細胞シートの生体への導入がシート条件による局所的応答性を誘導し得る可能性が示唆された。

Vascular endothelial cells, umbilical vein endothelial cells, vascular endothelial cells, pulmonary vascular cells, vascular smooth muscle cells, cardiac muscle cells, hepatic stromal cells, and temperature responsive culture dishes are suitable. The cells were cultured on the surface of the culture medium. This is the first time that the cells have been introduced into the body, and the tissue changes have been observed during the process. After 3 days, 7 days, and 14 days of introduction, the cells in the introduced sites were observed. The cells are introduced into the blood vessels and the blood vessels are surrounded by blood vessels. The results of this study indicate that there is no significant difference between the two types of cells. The differences in vascular induction under different cell conditions were discussed, and the results of HE staining and Azan staining of histological sections (section direction) were compared. The blood cells in the peripheral tissue of the introduction part tend to be more numerous than the vascular endothelial cells. Stratified co-culture tissues (cardiac muscle cells/vascular endothelial cells, smooth muscle cells/vascular endothelial cells, hepatocytes/vascular endothelial cells) were introduced into subcutaneous tissue and confirmed 7 days after introduction. There are many vascular tissues around the introduction site. The number of smooth muscle cells/vascular endothelial cells introduced into the same individual was more than that of hepatocytes/vascular endothelial cells, while the number of smooth muscle cells/vascular endothelial cells introduced into the same individual was less than that of hepatocytes/vascular endothelial cells. The possibility of induction of the response of the cell to the conditions for the introduction of the organism is demonstrated.