扁平上皮癌細胞の薬剤耐性と初期転写調節因子

鳞状细胞癌细胞的耐药性和早期转录调节因子

• 批准号: 03J01807
• 负责人: 岡村 裕彦
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J01807/
• 关键词: 扁平上皮癌; アポトーシス; 転写調節因子; MDR1; NF-Y; 扁平上皮癌細胞; 薬剤耐性

抗癌剤に対する感受性の違いにより二種類のヒト口腔扁平上皮癌細胞(SCCTF, SCCKN)が樹立された。SCCTF細胞はブレオマイシンやビンクリスチン(VCR)を含む多くの抗癌剤に対し耐性を示すが,SCCKN細胞は抗癌剤に対し感受性が高い。本研究では,これらの薬剤感受性の異なる口腔扁平上皮癌細胞を用いてmultidrug resistance-1 (MDR-1)遺伝子の発現およびその転写調節について検討した。VCRはMDR1蛋白を介して細胞外へ排出される薬剤であり,MDR1蛋白阻害剤で前処理することによりVCRによるアポトーシス誘導が強まることから,アポトーシスとMDR1遺伝子の関連が示唆された。両細胞におけるMDR1 mRNAの発現をRT-PCR法により調べ,その発現に関わるプロモーター領域および転写調節因子についてゲルシフトアッセイ法,クロマチン免疫沈降法,ルシフェラーゼアッセイ法を用いて比較検討した。SCCTF細胞はSCCKN細胞に比べMDR1 mRNAを高発現すること,投与したHoechst 33342を効率よく細胞外へ排出することが分かった。このことはSCCTF細胞のMDR1蛋白の薬剤排出能が高いことを示唆している。またSCCTF細胞ではMDR1プロモーター領域のCCAAT配列に対する転写調節因子NF-Yの結合能が高かった。CCAAT領域を含むルシフェラーゼコンストラクトを導入するとSCCTF細胞ではSCCKN細胞に対し10倍以上転写活性が上昇した。この配列を欠失,あるいは変異させたコンストラクトを導入した場合では転写活性の上昇は認められなかった。SCCTF細胞ではNF-YのサブユニットであるNF-YAが高発現していることが分かった。以上の結果より,SCCTF細胞におけるMDR1発現には転写調節因子NF-YとそのDNA結合領域が重要であることが分かった。

SCCTF (SCCKN) cell lines of oral flat epithelial carcinoma (OPCA) were isolated from anti-cancer cells, anti-cancer cells, sensitive cells, anti-cancer cells, anti-cancer cells and anti-cancer cells. SCCTF

项目成果

Okadaic acid induces apoptosis through double-stranded RNA-dependent protein kinase/eukaryotic initiation factor-2α pathway in human osteoblastic MG63 cells

• DOI: 10.1093/jb/mvh144
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: JOURNAL OF BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 2.7
• 作者: Morimoto, H;Okamura, H;Haneji, T
• 通讯作者: Haneji, T

K.Yoshida: "Stimulation of receptor activator of nuclear factor-kappa B ligand (RANKL) in mouse osteoblastic cells by okadaic acid"Biomedical Research. 14(2). 126-132 (2003)

K.Yoshida：“冈田酸对小鼠成骨细胞中核因子-κ B 配体 (RANKL) 受体激活剂的刺激”生物医学研究。

M.Fujita: "Okadaic acid stimulates expression of Fas receptor and Fas ligand by activation of nuclear factor kappa-B in human oral squamous carcinoma cells"Oral Oncology. 40(2). 199-206 (2004)

M.Fujita：“冈田酸通过激活人口腔鳞状癌细胞中的核因子 kappa-B 来刺激 Fas 受体和 Fas 配体的表达”口腔肿瘤学。

Double-stranded RNA mediates selective gene silencing of protein phosphatase type 1 delta isoform in HEK-293 cells

双链RNA介导HEK-293细胞中1型蛋白磷酸酶δ亚型的选择性基因沉默

• 发表时间: 2004
• 期刊: Journal of Enzyme Inhibition and Medical Chemistry 19
• 作者: Hiroyuki Morimoto

Transcription factor NF-Y regulates mdr1 expression through binding to inverted CCAAT sequence in drug-resistant human squamous carcinoma cells.

• DOI: 10.3892/ijo.25.4.1031
• 发表时间: 2004-10
• 期刊: International journal of oncology
• 影响因子: 5.2
• 作者: H. Okamura;Kaya Yoshida;Eiko Sasaki;H. Morimoto;T. Haneji