変異蛋白質を用いたナメクジウオロドプシンと多様な視物質との性質・機能の比較解析

利用突变蛋白比较分析文昌鱼视紫红质和各种视觉物质的性质和功能

基本信息

  • 批准号:
    03J05631
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 2.11万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 财政年份:
    2003
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2003 至 2005
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

ロドプシン類似の光受容蛋自質は、アミノ酸配列の相同性に基づき5種類のサブグループに分類できる。本研究は、ロドプシン類における活性化機構の類似点と相違点を明らかにすることを目的とする。具体的には、脊椎動物の視物質とは異なるサブグループに属するナメクジウオロドプシンの機能発現機構を、変異蛋白質を用いて解析し、よく研究されている脊椎動物の視物質(ウシロドプシン)と比較した。前年度までの研究から、ナメクジウオロドプシンの6番目の膜貫通ヘリックスに存在するAla269残基に変異を導入すると、光産物(活性状態)の吸収スペクトルが大きく変化し、G蛋白質活性化能が低下することを見いだした。なぜAla269変異が光産物に大きく影響するのか明らかにすることはナメクジウオロドプシンの機能発現機構の理解につながると考え、以下の実験を行った。1.Ala269変異の影響を小さくするAla269周辺の残基の変異を探索した。その結果5番目の膜貫通ヘリックスに存在するアミノ酸残基に変異を導入すると、Ala269変異の影響が小さくなった。一方、ウシロドプシンのAla269に変異を導入するとG蛋白質活性化能の低下は見られたが、光産物の吸収スペクトルへの影響はナメクジウオロドプシンの場合と異なった。2.ウシロドプシンにおいては、活性状態への構造変化(構成的活性化)を誘起する変異が知られている。その中の代表的な変異をナメクジウオロドプシンのAla269変異体において対応する位置に導入した。その結果光産物の吸収スペクトルが野生型様に戻ることが示唆された。以上の結果から、ナメクジウオロドプシンが活性状態を形成する上で5番目と6番目の膜貫通ヘリックスのAla269周辺領域が構造変化することを見いだした。ウシロドプシンにおいても同様の構造変化は重要であるが、ナメクジウオロドプシンとは相違点も存在する可能性を見いだした。
The type of the system is similar to that of the light-tolerant egg, and the acid is arranged in the same class as the basic class of the system. In this study, the mechanism of activation is similar to each other, and the purpose of this study is different. The specific equipment of the spine and the animal of the spine can be detected by the machine that can be used to detect the mechanism, the protein can be analyzed by the computer, and the results of the study can be compared with each other. In the previous year, the study was carried out, and the results showed that there were Ala269 residues in the membrane, light absorption, activation of G protein and activation of G protein. The main purpose of this paper is to show that the Ala269 system is capable of showing that the organization understands the performance of the examination, and the following information is available. 1.Ala269 movie small Ala269 week residue explore. Results the results showed that there were some acid residues in the membrane, and there were some acid residues in the membrane. The acid residues were detected in the membrane, and the acid residues were detected in the membrane. The results showed that there were some acid residues in the membrane, and there were some acid residues in the membrane. The results showed that there were some acid residues in the membrane, and there were some acid residues in the membrane. The results showed that there were some acid residues in the membrane, and there were some acid residues in the membrane. On the other hand, the activation energy of G protein is lower than that of Ala269 protein, and the absorption of light is low. two。 As a result, the formation of the active state (the activation of the formation) is affected by the formation. The location in the middle of the box represents the location of the Ala269 in the middle of the window. Results the results showed that the wild-type animal was instigated by inhalation. The results of the above results show that there are significant changes in the activity of the membrane in the field of Ala269. In the same way, there is a possibility that there is a possibility that there is an important situation in the same way.

项目成果

期刊论文数量(2)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
A rhodopsin exhibiting binding ability to agonist all-trans-retinal.
一种视紫红质,具有激动全反式视网膜的结合能力。
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    0
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  • 作者:
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