TGF-ß signaling in chondrogenesis - in vivo analysis of Smad protein function by generation of chondrocyte specific knock-out mouse models

软骨形成中的 TGF-α 信号传导 - 通过生成软骨细胞特异性敲除小鼠模型对 Smad 蛋白功能进行体内分析

• 批准号: 5334204
• 负责人: Professor Dr. Bernhard Zabel
• 金额: --
• 依托单位: Zentrum für Kinder- und Jugendmedizin
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2004-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5334204?language=en
• 关键词: TGF; signaling; chondrogenesis; vivo; analysis

Das gesamte Längenwachstum des Skeletts erfolgt fast ausschließlich in der Wachstumsfuge. Dort durchlaufen die Chondrozyten in verschiedenen Zonen eine Abfolge spezifischer Proliferations- und Differenzierungsschritte, an deren Steuerung Mitglieder der TGF-ß-Proteinfamilie wesentlich beteiligt sind. Als Signalmediatoren der TGF-ß-Rezeptoren konnten in jüngster Zeit eine Reihe sogenannter Smad-Proteine identifiziert werden. Die Untersuchung der entscheidenden Rolle von Smad2 und Smad4 in der Chondrogenese entzog sich bisher einer gezielten Analyse, da die entsprechenden knock-out Mutanten in frühen Entwicklungsstadien letal sind. In dem hier beschriebenen Projekt soll durch einen konditionalen knock-out Ansatz diese Frühletalität umgangen und Smad2- bzw. Smad4-Funktionsanalysen in Knorpelgewebe ermöglicht werden. Der Versuchsablauf sieht vor, Expressionskassetten, die u.a. eine Cre-Rekombinase enthalten, unter die Kontrolle des Chondrozyten-spezifischen Typ II-KollagenPromotors bzw. des endogenen Kollagen Typ X-Promotors zu stellen, wodurch eine spezifische Expression der Cre-Rekombinase in proliferierenden bzw. hypertrophen Chondrozyten erreicht wird. Weiterhin sollen zwei Mauslinien generiert werden, die jeweils das erste Exon der Gene Smad2 bzw. Smad4 von IoxP-Sequenzen flankiert werden. Die im Antrag detailliert dargestellte Strategie zielt also darauf ab, die für Smad2 und Smad4 codierenden Gene selektiv in verschiedenen Zonen der Wachstumsfuge auszuschalten und somit ihre umfassende in vivo Analyse zu ermöglichen.

这是一个快速的Längenwachstum des muscle folgt ausschließlich in der Wachstumsfuge。通过对软骨组织中的特异性表达和差异性表达的研究，发现TGF-β-蛋白家族的调节作用是有效的。TGF-β-Rezeptoren的信号介导作用在早期可用于Smad-Protein的鉴定韦尔登。对Smad 2和Smad 4在软骨发生中的作用的研究需要进行一个简单的分析，即在早期发育阶段进行基因敲除突变。在该项目中，通过一个特定的淘汰赛淘汰了安东尼斯·弗鲁莱特莱特和Smad 2- bzw。Smad 4-功能分析在Knorpelgewebe ermöglicht韦尔登。Der Versuchsablauf seeht vor，Expressionskassetten，die u.a.一种Cre-Rekombinase酶，通过控制软骨素特异性II型-KollagenPromotors bzw。通过内源性Kollagen Typ X-Promotors来抑制Cre-Rekombinase在增殖细胞中的特殊表达。软骨细胞肥大。结果发现Smad 2基因的第一个外显子有两个韦尔登。Smad 4来自IoxP测序的侧翼韦尔登。Die im Antrag detailliert dargestellte plugie zielt also darauf ab，die für Smad2 and Smad4 codierenden Gene selektiv in vertebrendenen Zonen der Wachstumsfuge auszuschalten and somit ihre umfassessment in vivo Analyse zu ermöglichen.