ヒト口腔上皮細胞の自然免疫応答-特に歯周病発症との関わり-

人类口腔上皮细胞的先天免疫反应 - 特别是其与牙周病发病的关系 -

• 批准号: 03J06961
• 负责人: 上原 亜希子
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J06961/
• 关键词: NOD1; NOD2; TLR; MDP; DMP; lipopeptides; lipid A; NFkappaB; 口腔上皮細胞; 歯肉線維芽細胞; protease-activated receptor; proteinase 3; human leukocyte elastase; cathepsin G; G protein-coupled receptor; secretory leukocyte protease inhibitor

NOD系とTLR系を介する刺激の相乗作用最近、nucleotide-binding oligomerization domain(NOD)ファミリー分子がマイコプラズマを除くほとんどすべての細菌細胞壁を構成するペプチドグリカン(peptidoglycan ; PGN)を細胞内で認識して炎症性サイトカイン産生など自然免疫応答を発現することが米(ミシガン大学)・仏(パスツール研究所)二つのグループの研究によって判明した。即ち、NOD1はジアミノピメリン酸(diaminopimelic acid ; DAP)を含むPGNのペプチド部分を、NOD2はムラミルジペプチド(muramyldipeptide ; MDP)を認識する。我々は、細菌菌体表層成分を模した化学合成した各種NODリガンドと各種TLRリガンドによるヒト単球系THP-1細胞に対する相乗作用を遺伝子はRT-PCR法、タンパクはフローサイトメトリー・ELISA法ならびに免疫蛍光染色法により検討した。その結果、供試標品(FK156およびFK565ならびにγ-D-Glu-meso-DAP[NOD1リガンド]、合成MDP[NOD2リガンド]、大腸菌型合成リピドA[TLR4リガンド]、大腸菌型合成リポペプチドPam3CSSNA[TLR2リガンド]細菌型CpG DNA[TLR4リガンド]はいずれもTHP-1細胞に作用しinterleukin-8や腫瘍壊死因子TNF-α産生を増強したが、NODリガンドの作用はTLRリガンドに比べて著しく弱かった。また、供試したNODリガンドを組み合わせて刺激すると著しい相乗作用が認められた。さらにそのレセプターシステムを解析するためにRNA干渉法により、NOD1もしくはNOD2遺伝子発現を特異的に抑制したトランスフェクタントを作成した。親細胞ならびにこれらのトランスフェクタントを供試したところ、NOD1リガンドとNOD2リガンドのTLRリガンドとの相乗作用は、それぞれNOD1とNOD2依存的な転写因子NFkappaB活性化に基づくことが判明した。

NOD and TLR are involved in the formation of the bacterial cell wall, which is the most recent, nucleotide-binding oligomerization domain(NOD).(peptidoglycan ; PGN) is recognized in cells, inflammatory cells are produced, and natural immune responses are developed. That is, NOD1 is recognized as a diaminopimelic acid (DAP) containing PGN and NOD2 is recognized as a muramyldipeptide (MDP). The chemical synthesis of bacterial cell surface components, the interaction of NOD and TLR with THP-1 cells, and the detection by RT-PCR, ELISA, and immunoluminescence staining were studied. These results, test standards (FK156 and FK565), γ-D-Glu-meso-DAP[NOD1], synthetic MDP[NOD2], coliform synthetic CpG DNA [TLR4], coliform synthetic CpG DNA [TLR4], and bacterial CpG DNA[TLR4] showed an increase in the production of interleukin-8 and TNF-α in THP-1 cells. NOD is used for TLR. The effect of the stimulus on the NOD response was recognized. In addition, the RNA stem analysis method, NOD1 and NOD2 gene expression are specially designed to suppress the RNA stem expression. The interaction between NOD1 and NOD2 was found to be related to the activation of NFkappaB, a NOD1-and NOD2-dependent factor.

项目成果

Chemically synthesized pathogen-associated molecular patterns increase the expression of peptidoglycan recognition proteins via Toll-like receptors, NOD1 and NOD2 in human oral epithelial cells

• DOI: 10.1111/j.1462-5822.2004.00500.x
• 发表时间: 2005-05-01
• 期刊: CELLULAR MICROBIOLOGY
• 影响因子: 3.4
• 作者: Uehara, A;Sugawara, Y;Takada, H
• 通讯作者: Takada, H

Endogenous IL-15 sustains recruitment of IL-2Rβ and common γ and IL-2-mediated chemokine production in normal and inflamed human gin

内源性 IL-15 在正常和发炎的人杜松子酒中维持 IL-2Rβ 的募集以及常见 γ 和 IL-2 介导的趋化因子的产生

• 发表时间: 2004
• 期刊: The Journal of Immunology Vol.173 No.8
• 作者: Haruhiko Takada;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Ozawa
• 通讯作者: Akiko Ozawa

Arginine-specific gingipains from Porphyromonas gingivalis stimulate production of hepatocyte growth factor (scatter factor) through protease-activated receptors in human gingival fibroblasts in culture.

来自牙龈卟啉单胞菌的精氨酸特异性牙龈蛋白酶通过培养的人牙龈成纤维细胞中的蛋白酶激活受体刺激肝细胞生长因子（分散因子）的产生。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Immunology 175
• 作者: Uehara;A.;Muramoto;K.;Imamura;T.;Nakayama;K.;Potempa;J.;Travis;J.;Sugawara;S.;Takada;H.;Uehara et al.
• 通讯作者: Uehara et al.

Proinflatmmatory cytokines induce proteinase 3 (PR3) as membrane-bound and secretory forms in human oral epithelial cells and antibod

促炎症细胞因子在人口腔上皮细胞和抗体中诱导蛋白酶 3 (PR3) 作为膜结合和分泌形式

• 发表时间: 2004
• 期刊: The Journal of Immunology Vol.173 No.6
• 作者: Haruhiko Takada;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Uehara;Akiko Uehara
• 通讯作者: Akiko Uehara

Toll-like receptors, NOD1, and NOD2 in oral epithelial cells

• DOI: 10.1177/154405910608500609
• 发表时间: 2006-06-01
• 期刊: JOURNAL OF DENTAL RESEARCH
• 影响因子: 7.6
• 作者: Sugawara, Y.;Uehara, A.;Takada, H.
• 通讯作者: Takada, H.