難治性炎症疾患におけるオステオポンチン作用の分子機序の解明

阐明骨桥蛋白在顽固性炎症性疾病中作用的分子机制

• 批准号: 03J50011
• 负责人: 森本 純子
• 金额: $ 0.51万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J50011/
• 关键词: オステオポンチン; 肉芽腫形成; β-glucan; 肝障害; ケモカイン; インターロイキン12; インターフェロンγ

1.酵母菌体成分であるβ-glucanをオステオポンチンノックアウト(OPN-/-)マウスに静脈内投与するとOPN-/-マウスではワイルドタイプ(WT)マウスと比べ肝臓内の肉芽腫形成遷延化および肝障害が低下することを明らかにした。OPNは肉芽腫形成遷延化に関与することが示唆された。2.OPNに対する特異的抗体を用いて免疫染色を行ったところ、WTマウスの肉芽腫内においてOPN蛋白の強い発現が認められた。OPNが肉芽腫形成に重要な分子であることが示唆された。3.肝臓内に発現する様々なケモカインの発現をリアルタイムPCR法および免疫染色により検討した結果、WTマウスとOPN-/-マウス間でその発現量に差を認めなかった。OPN-/-マウスにおける肉芽腫形成遷延化能の低下は、ケモカイン産生能の低下に起因するものではないことが示唆された。4.局所リンパ節である肝リンパ節における樹状細胞,CD4T細胞,CD8T細胞の数をフローサイトメトリ-を用いて検討したところ、β-glucan投与に伴う著しい増加が認められたが、両マウス問で差は認められなかった。さらにリンパ節細胞を抗CD3抗体で刺激した後、培養上清中のIL-2およびIFN-γの産生について検討したが、両者間で差は認められなかった。5.免疫染色により肝臓内浸潤細胞(CD4T細胞,樹状細胞,マクロファージ)を検討した結果、肉芽腫瘍形成後期段階において、OPN-/-マウスではこれら浸潤細胞の数が減少していた。OPN-/-マウスでは肉芽腫瘍形成後期段階において、炎症性細胞の肝臓内浸潤が低下するために、肉芽腫形成遷延化および肝障害が低下することが示唆された。6.OPN-/-マウスでは、肉芽腫形成初期段階で肝臓内におけるIL-12およびIFN-γの産生が低下していた。また肉芽腫形成後期段階ではTNF-α産生量の低下を認めた。しかしながらIL-4およびIL-10の産生量は、両者間で差は認められなかった。OPN-/-マウスでは肉芽腫形成初期段階において、肉芽腫内のIFN-γおよびIL-12の産生量が低下するために肉芽腫形成遷延化および肝障害が低下することが示唆された。

1. Yeast cell component: β-glucan, OPN-/-, OPN-/OPN-, OPN-/-, OPN-/ OPN granuloma formation delayed and related factors 2. OPN specific antibodies were used to detect the strong expression of OPN protein in granulomas. OPN plays an important role in granuloma formation. 3. The detection of liver cancer by PCR and immunostaining was investigated. The detection of liver cancer by PCR and OPN-/-was investigated. OPN-/-granuloma formation delayed chemical energy reduction, the cause of the reduction in production energy 4. The number of dendritic cells, CD4 T cells, CD8 T cells in the liver and the liver is increased by increasing the number of dendritic cells, CD4 T cells and CD8 T cells. The production of IL-2 and IFN-γ in cultured supernatant after stimulation by anti-CD3 antibody in cultured cells was investigated. 5. Immunostaining showed that the number of infiltrating cells in liver (CD4 T cells, dendritic cells, etc.) decreased in the late stages of granuloma formation. OPN-/- 6. The production of IL-12 and IFN-γ in liver tissue decreased during the initial stage of granuloma formation. The production of TNF-α decreased in the late stage of granuloma formation. The difference between IL-4 and IL-10 production was significant. OPN-/-α-granuloma formation in the initial stage, granuloma IFN-γ and IL-12 production decreased, granuloma formation delayed, liver damage decreased, this is the first sign of granuloma formation.

项目成果

Tanaka, K.: "Effect of osteopontin alleles on β-Glucan-Induced Granuloma Formation in the Mouse Liver"American Journal of Pathology. 164. 567-575 (2004)

Tanaka, K.：“骨桥蛋白等位基因对小鼠肝脏中 β-葡聚糖诱导的肉芽肿形成的影响”美国病理学杂志 164. 567-575 (2004)。

Morimoto, J.: "Osteopontin affects the persistence of β-glucan-induced hepatic granuloma formation and tissue injury through two distinct mechanisms"International Immunology. (In press).

Morimoto, J.：“骨桥蛋白通过两种不同的机制影响 β-葡聚糖诱导的肝肉芽肿形成和组织损伤的持续性”《国际免疫学》（正在出版）。