遺伝子治療と免疫治療を併用した新規がん免疫遺伝子治療法の確立

建立基因治疗与免疫治疗相结合的癌症免疫基因治疗新方法

• 批准号: 03J61515
• 负责人: 鈴木 利宙
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J61515/
• 关键词: 樹状細胞療法; 塩酸ゲムシタビン; 免疫調節サイトカイン; 免疫遺伝子治療; siRNA; VEGF; OK-432; PGE2; 遺伝子治療法; p53標的遺伝子; アデノウイルス; ゲムシタビン

今年度、本研究ではゲムシタビンと樹状細胞(DC)の併用療法の確立を目的とした実験を行った。現在までに、ゲムシタビン単独投与による一過性の抗腫瘍効果、ならびに脾臓におけるCD4およびCD8陽性T細胞の比率の増加が報告されている。そこで我々の実験系において同様の検討を行ったところ、単独投与による抗腫瘍効果は確認できたが、二次リンパ組織におけるT細胞の増加は確認できなかった。さらに、ゲムシタビン投与とともに未成熟DCを腫瘍内投与し併用効果を検討したが、抗腫瘍効果の増強は確認できなかった。以上の結果から、ゲムシタビンとDC療法との単純な併用では、治療効果の改善につながらないことが示唆された。腫瘍を標的とした免疫療法を考えるうえで、腫瘍由来因子による抗腫瘍免疫の抑制が重要な問題としてあげられる。このような因子の発現抑制にsiRNA発現ベクターが有用ではないかと考え以下の研究を進めた。まず、腫瘍細胞におけるVEGFの発現をRNAiにより抑制することを試みた。VEGFは、DCの分化阻害および機能抑制を誘導することが報告されている。VEGFを標的としたsiRNA発現ベクターを作成し、Effectene Transfection Reagent(QIAGEN)を用いてMCA205にトランスフェクションした。その結果、MCA205におけるVEGFの発現を約3分の1に抑制することができた。次に、腫瘍由来因子がDCの分化に与える影響を検討した。NIH3T3またはMCA205の培養上清を用いてDCを誘導し、産生されるCD11c+細胞の数およびClassIIの発現を比較したが、顕著な差は認められなかった。DCのT細胞刺激能においてVEGFの影響を検討した報告がなされていることから、培養上清を用いて誘導したDCのT細胞刺激能を検討する必要があると考えられる。

This year, the purpose of this study is to determine the purpose of this study. The purpose of this study is to determine the purpose of this study. The purpose of this study is to determine the purpose of this study. The purpose of this study is to determine the purpose of this study. This year, this year, the purpose of this study is to make sure that the purpose of this study is to use the method. At present, there is an increase in the proportion of women who vote alone and those who have sex-related diseases, such as CD4, CD8, sex, gender, gender, We do not know if you are the same as you are, so you can make sure that you are safe, and that you can make sure that you do not want to do so. Please note that the immature DC is not mature enough to be injected into the body, and that the results are not good enough. The results of the above results show that the DC method is effective in the use and treatment of drugs. The method of immunization is used to determine the cause of the disease, the source factor, the immune suppression, the important problem, the immune suppression, the immune suppression. The following research progress has been carried out through the study of the following factors that inhibit the development of siRNA. This is the first time that the VEGF has been detected. The RNAi will be suppressed. The differentiation and blockage of VEGF and DC can inhibit the accuracy of reports. The siRNA siRNA of VEGF has been completed, and Effectene Transfection Reagent (QIAGEN) has been shown to use the command MCA205 to make sure that it is not working. The results showed that the MCA205 response to VEGF was about 3. 1%, and the inhibition was significant. The secondary and secondary factors are the differentiation of "DC" and the shadow of "differentiation". The supernatant of NIH3T3 MCA205 culture uses the DC guide, the CD11c+ cell count, the ClassII cell count, and the difference between the two. DC

项目成果

Sato M, Takayama T, Tanaka H, Konishi J, Suzuki T, Kaiga T, Tahara H.: "Generation of Mature Dendritic Cells Fully Capable of T Helper Type 1 Polarization Using OK-432 Combined with Prostaglandin E2."Cancer Science. 94. 1091-1098 (2003)

Sato M、Takayama T、Tanaka H、Konishi J、Suzuki T、Kaiga T、Tahara H.：“使用 OK-432 与前列腺素 E2 结合生成完全能够进行 T 辅助细胞 1 型极化的成熟树突状细胞。”癌症科学。