構成的に発現しているI型IFNシグナルによる癌化抑制メカニズムの解明

通过组成型表达的 I 型 IFN 信号阐明癌变抑制机制

• 批准号: 03J61523
• 负责人: 柳井 秀元
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J61523/
• 关键词: インターフェロン; 形質細胞様樹状細胞; MyD88; IRF; Toll-like receptor; TRAF6; IRAK4; CTTP; p53; 抗腫瘍; アポトーシス; 抗ウイルス応答; 転写調節; 光親和性標識

これまで構成的なIFN-α/βのシグナルの異常が細胞のトランスフォーメーションを引き起こすことを見出し、新しい発がんの制御機構の解明を目指して、この構成的なIFN-α/βのシグナルのがん化抑制の作用について詳細な検討を進めてきた.そこでさらに,生体内でもっとも強力にIFN-α/βを産生する細胞として知られているpDCにおける大量のIFN-α/βの産生メカニズムについて検討することにした.pDCにおいては非メチル化DNAや一本鎖RNAなどを認識し,Toll様受容体であるTLR9やTLR7(8)を介してMyD88依存性にIFN-α/βが大量産生される事が報告されていた.今回,我々は,このTLR7およびTLR9下流でのIFN遺伝子誘導において,従来ウイルス感染によるIFN遺伝子誘導に必須であることが知られているIRF-3およびIRF-7転写因子の関連性について検討を行った.その結果,FRET(fluorescence resonance energy transfer)解析や免疫沈降実験により,細胞質においてIRF-7がMyD88と会合することを見出した.一方IRF-3はMyD88とは会合しないことが示された.また,luciferase reporter assayやCpG-A ODN(oligodeoxynucleotide)刺激による核移行の解析の結果,MyD88依存性にIRF-7が活性化され,核移行することも明らかとなった.またIRF-7はTRAF6がIRF-7と会合し,その活性化に関与することも見出した.さらに,従来,IRAK4はMyD88と会合し,下流のNF-kB活性化につながる必須の分子であることが知られていたが,今回MyD88欠損マウス由来のpDCsと同様にIRAK4欠損マウス由来のpDCsにおいてCpG-A ODNおよび一本鎖RNA刺激によるIFN-α産生誘導が全く消質することもわかり,TLR9-MyD88下流におけるIRF-7の活性化にIRAK4が関与していることも示唆された.さらにIRF-7欠損マウスを作成して解析を進めたところ,IRF-7遺伝子欠損マウス由来pDCにおいては非メチル化DNAや一本鎖RNA刺激によるIFN産生が全く認められなかった.これらの結果,おそらくTLR7/9直下においてMyD88をはじめIRF-7,TRAF6やIRAK4を含む複合体(CTTP)が何らかの制御のもとに,少なくとも1つはIRF-7を介したIFN産生誘導経路と,もう一つは炎症性サイトカイン発現経路を分岐しているものと考えられた.

This paper presents a detailed discussion on the mechanism of IFN-α/β interaction and its inhibitory effect on cell growth. In vivo, cells that strongly produce IFN-α/β are known to produce large amounts of IFN-α/β in pDC. In pDC, large amounts of IFN-α/β are produced in cells that are known to be TLR9 and TLR7 (8) dependent on MyD88. In this paper, I would like to discuss the relationship between IFN-3 and IRF-7 gene expression factors in the downstream of TLR7 and TLR9. As a result,FRET(fluorescence resonance energy transfer) analysis and immunoprecipitation analysis were performed, and cytoplasmic IRF-7 and MyD88 were found to converge. One side IRF-3 MyD88. Results of the analysis of nuclear migration induced by CpG-A ODN(oligodeoxynucleotide) stimulation, MyD88-dependent activation of IRF-7, and nuclear migration. IRF-7 and TRAF-6 meet, and the activation of IRF-7 is related to the emergence of IRF-7. In the past, IRAK4 has been linked to MyD88 and downstream NF-kB activation, and now MyD88 is deficient in pDCs. IRAK4 is deficient in pDCs, and CpG-A ODN is deficient in pDCs, and IFN-α production is induced by RNA stimulation. TLR9-MyD88 downstream IRF-7 activation IRAK4 is related to the development of the virus. IRF-7 gene deficiency is caused by DNA and RNA stimulation, and IFN production is fully recognized. As a result, MyD88 was found to be involved in the control of IRF-7, TRAF6 and IRAK4 complex (CTTP) in TLR7/9, and the IFN production pathway was induced by IRF-7.

项目成果

IRF-7 is the master regulator of type-I interferon-dependent immune responses

• DOI: 10.1038/nature03464
• 发表时间: 2005-04-07
• 期刊: NATURE
• 影响因子: 64.8
• 作者: Honda, K;Yanai, H;Taniguchi, T
• 通讯作者: Taniguchi, T

Integral role of IRF-5 in the gene induction programme activated by Toll-like receptors

• DOI: 10.1038/nature03308
• 发表时间: 2005-03-10
• 期刊: NATURE
• 影响因子: 64.8
• 作者: Takaoka, A;Yanai, H;Taniguchi, T
• 通讯作者: Taniguchi, T

MyD88-IRF-7 signalling pathway of Type-I interferon induction is contingent on spatiotemporal regulation

I型干扰素诱导的MyD88-IRF-7信号通路取决于时空调节

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nature (in press)
• 作者: Honda;K.;Ohba;Y.;Yanai;H.et al.
• 通讯作者: H.et al.

Akinori Takaoka, Sumio Hayakawa, Hideyuki Yanai, et al.: "Integration of interferon-α/β signalling to p53 responses in tumor suppression and antiviral defense"Nature. 424. 516-523 (2003)

Akinori Takaoka、Sumio Hayakawa、Hideyuki Yanai 等人：“干扰素-α/β 信号传导与肿瘤抑制和抗病毒防御中 p53 反应的整合”Nature 424. 516-523 (2003)。

Role of a transductional-transcriptional processor complex involving MyD88 and IRF-7 in Toll-like receptor signaling

• DOI: 10.1073/pnas.0406933101
• 发表时间: 2004-10-26
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Honda, K;Yanai, H;Taniguchi, T
• 通讯作者: Taniguchi, T