構成的に発現しているI型IFNシグナルによる癌化抑制メカニズムの解明

通过组成型表达的 I 型 IFN 信号阐明癌变抑制机制

• 批准号: 03J61523
• 负责人: 柳井 秀元
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J61523/
• 关键词: インターフェロン; 形質細胞様樹状細胞; MyD88; IRF; Toll-like receptor; TRAF6; IRAK4; CTTP; p53; 抗腫瘍; アポトーシス; 抗ウイルス応答; 転写調節; 光親和性標識

これまで構成的なIFN-α/βのシグナルの異常が細胞のトランスフォーメーションを引き起こすことを見出し、新しい発がんの制御機構の解明を目指して、この構成的なIFN-α/βのシグナルのがん化抑制の作用について詳細な検討を進めてきた.そこでさらに,生体内でもっとも強力にIFN-α/βを産生する細胞として知られているpDCにおける大量のIFN-α/βの産生メカニズムについて検討することにした.pDCにおいては非メチル化DNAや一本鎖RNAなどを認識し,Toll様受容体であるTLR9やTLR7(8)を介してMyD88依存性にIFN-α/βが大量産生される事が報告されていた.今回,我々は,このTLR7およびTLR9下流でのIFN遺伝子誘導において,従来ウイルス感染によるIFN遺伝子誘導に必須であることが知られているIRF-3およびIRF-7転写因子の関連性について検討を行った.その結果,FRET(fluorescence resonance energy transfer)解析や免疫沈降実験により,細胞質においてIRF-7がMyD88と会合することを見出した.一方IRF-3はMyD88とは会合しないことが示された.また,luciferase reporter assayやCpG-A ODN(oligodeoxynucleotide)刺激による核移行の解析の結果,MyD88依存性にIRF-7が活性化され,核移行することも明らかとなった.またIRF-7はTRAF6がIRF-7と会合し,その活性化に関与することも見出した.さらに,従来,IRAK4はMyD88と会合し,下流のNF-kB活性化につながる必須の分子であることが知られていたが,今回MyD88欠損マウス由来のpDCsと同様にIRAK4欠損マウス由来のpDCsにおいてCpG-A ODNおよび一本鎖RNA刺激によるIFN-α産生誘導が全く消質することもわかり,TLR9-MyD88下流におけるIRF-7の活性化にIRAK4が関与していることも示唆された.さらにIRF-7欠損マウスを作成して解析を進めたところ,IRF-7遺伝子欠損マウス由来pDCにおいては非メチル化DNAや一本鎖RNA刺激によるIFN産生が全く認められなかった.これらの結果,おそらくTLR7/9直下においてMyD88をはじめIRF-7,TRAF6やIRAK4を含む複合体(CTTP)が何らかの制御のもとに,少なくとも1つはIRF-7を介したIFN産生誘導経路と,もう一つは炎症性サイトカイン発現経路を分岐しているものと考えられた.

到目前为止，我们已经发现，本构IFN-α/β信号中的异常引起细胞的转化，并一直对抑制PDC中这种组成型IFN-α/β信号抑制癌症形成的效果进行了详细研究，该pDC是最有效的细胞，被称为最有效的细胞，该细胞产生IFN-α/βInVivo。在PDC中，我们决定研究大量IFN-α/β的生产机理。在PDC中，我们尚未测量PDC的代谢作用。据报道，IFN-α/β是通过Toll样受体TLR9和TLR7以MyD88依赖性方式产生的（8）。在这项研究中，我们研究了IRF-3和IRF-7转录因子之间的关系，这对于通过病毒感染诱导IFN基因是必不可少的，通常已知这对于通过病毒感染诱导IFN基因至关重要。结果，FRET（荧光）（共振能量传递）分析和免疫沉淀实验发现IRF-7与细胞质中的MyD88相关。同时，IRF-3与MYD88没有关联。此外，ODN（寡脱氧核苷酸）刺激的荧光素酶报告基因测定和CPG-A核转运分析表明，IRF-7被激活并以MyD88依赖性方式激活和核转移。还发现IRF-7与IRF-7相关并参与其激活。此外，以前知道Irak4与MyD88相关，并且是导致下游NF-KB激活的必不可少的分子。但是，在这种情况下，IRAK4是一种至关重要的分子，它与MyD88相关，并导致来自IRAK4缺陷小鼠PDC中的NF-KB激活，以及MyD88缺陷小鼠的PDC。还发现，ODN和单链RNA诱导IFN-α产生，这表明IRAK4参与了TLR9-MYD88下游的IRF-7激活。此外，当创建IRF-7缺陷小鼠并进行分析时，未分析IRF-7缺陷小鼠，并且未通过刺激非甲基化DNA或单链RNA观察到IFN产生。结果，人们认为，在某些控制下，在某些控制下，含有IRF-7的MyD88，IRF-7，TRAF6和IRAK4复合物（CTTP）至少是IRF-7介导的IRF-7介导的IFN IFN产生诱导途径的一种途径，以及炎症细胞因子表达的其他途径。

项目成果

IRF-7 is the master regulator of type-I interferon-dependent immune responses

• DOI: 10.1038/nature03464
• 发表时间: 2005-04-07
• 期刊: NATURE
• 影响因子: 64.8
• 作者: Honda, K;Yanai, H;Taniguchi, T
• 通讯作者: Taniguchi, T

Integral role of IRF-5 in the gene induction programme activated by Toll-like receptors

• DOI: 10.1038/nature03308
• 发表时间: 2005-03-10
• 期刊: NATURE
• 影响因子: 64.8
• 作者: Takaoka, A;Yanai, H;Taniguchi, T
• 通讯作者: Taniguchi, T

Role of a transductional-transcriptional processor complex involving MyD88 and IRF-7 in Toll-like receptor signaling

• DOI: 10.1073/pnas.0406933101
• 发表时间: 2004-10-26
• 期刊: PROCEEDINGS OF THE NATIONAL ACADEMY OF SCIENCES OF THE UNITED STATES OF AMERICA
• 影响因子: 11.1
• 作者: Honda, K;Yanai, H;Taniguchi, T
• 通讯作者: Taniguchi, T

MyD88-IRF-7 signalling pathway of Type-I interferon induction is contingent on spatiotemporal regulation

I型干扰素诱导的MyD88-IRF-7信号通路取决于时空调节

• 发表时间: 2005
• 期刊: Nature (in press)
• 作者: Honda;K.;Ohba;Y.;Yanai;H.et al.
• 通讯作者: H.et al.

Akinori Takaoka, Sumio Hayakawa, Hideyuki Yanai, et al.: "Integration of interferon-α/β signalling to p53 responses in tumor suppression and antiviral defense"Nature. 424. 516-523 (2003)

Akinori Takaoka、Sumio Hayakawa、Hideyuki Yanai 等人：“干扰素-α/β 信号传导与肿瘤抑制和抗病毒防御中 p53 反应的整合”Nature 424. 516-523 (2003)。