高度なタンパク質安定化作用と物理的安定性を兼備した新規糖類アモルファス構造の創製

创建结合高蛋白质稳定作用和物理稳定性的新型糖无定形结构

• 批准号: 15760558
• 负责人: 今村 維克
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15760558/
• 关键词: 糖類アモルファス構造; 複合マトリクス; タンパク質安定化; 物理的安定性; ガラス転移; デキストラン; スクロース; 凍結乾燥

目的高度なタンパク質安定化作用と物理的安定性を併せ持つ新規な糖類アモルファスマトリクスの構築を最終目標として,高度なタンパク質安定化作用を有する少糖と高い物理的安定性を有する多糖を組み合わせた少糖-多糖複合アモルファスの物理特性およびマトリクス内における分子間相互作用について検討した.実験方法スクロ-スおよびデキストランを様々な割合(0〜100%)で含む水溶液を調製した.一部の試料溶液には塩を0.1〜100mMになるように添加した.試料溶液を液体窒素で急速凍結して室温で1日凍結乾燥した.その後,さらにP_2O_5を入れた真空デシケータ内(37℃)で3日間絶乾処理することにより,少糖-多糖複合アモルファス試料を得た.少糖-多糖複合アモルファス内の分子間相互作用を解析するため,試料を一定相対湿度(RH 11,23,33%)下で平衡化後,含水率,ガラス転移温度(Tg)を測定した.試料の含水率は重量法およびKarl-Fischer法により測定し,ガラス転移温度は示差走査熱分析により測定した.結果スクロースーデキストラン複合アモルファス試料の水分収着特性を解析した結果,複合試料の平衡含水率はスクロースおよびデキストランそれぞれ単体のときの値から算出される理論値よりも低くなることが分かった.これはスクロースとデキストランが共存することでスクロース-デキストラン分子間に相互作用が形成し,それぞれ単体で存在するときよりも水和サイトが減少したことを意味している.一方,スクロース-デキストラン複合アモルファス試料のガラス転移温度に及ぼす塩の影響を調べた結果,リン酸塩の共存によるガラス転移温度の変化は認められなかったが,塩化ナトリウムや塩化アンモニウムはガラス転移温度を低下させることが分かった.

Objective: To study the molecular interaction between polysaccharide and polysaccharide complex. The method of preparation of aqueous solutions containing chlorine is to combine (0 ~ 100%) with the solution of chlorine. A portion of the sample solution was added at 0.1 to 100 mM. Sample solution is liquid and freezes rapidly at room temperature for 1 day. After that, P_2O_5 was introduced into the vacuum chamber (37℃) for 3 days. Analysis of molecular interactions in oligosaccharide-polysaccharide complexes; determination of moisture content and temperature shift (Tg) after equilibration of samples at relative humidity (RH 11, 23, 33%). The moisture content of the sample is determined by gravimetric method and Karl-Fischer method, and by differential thermal analysis. Results The equilibrium moisture content of the composite sample is calculated from the theoretical value of the monomer. Intermolecular interactions are formed, and the existence of a single molecule is implied by the coexistence of water and oxygen. On the other hand, the influence of temperature and humidity on the sample temperature and humidity was investigated. The results showed that the temperature of temperature and humidity of sample temperature were decreased.

项目成果

糖類アモルファスマトリクスにおける糖-タンパク質間相互作用とタンパク質の安定化

糖无定形基质中的糖-蛋白质相互作用和蛋白质稳定性

• 发表时间: 2005
• 期刊: 低温生物工学会誌
• 作者: 今村維克