ヒト肝臓における薬物輸送に関与するトランスポーターの寄与率の定量的評価法の構築

转运体参与人肝脏药物转运贡献率定量评价方法的构建

• 批准号: 15790087
• 负责人: 前田 和哉
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790087/
• 关键词: トランスポーター; 肝取り込み; OATP; ヒト肝細胞; 寄与率; 胆汁排泄

これまで、排泄側のトランスポーターの機能解析は、主に膜ベシクルか排泄トランスポーターを発現した細胞が用いられてきたが、膜ベシクルでは、輸送活性の小さい化合物の評価が困難であり、また、排泄トランスポーター発現系では、取り込みにもトランスポーターを要するような化合物の輸送の評価が困難である。従って、本年度は、主に肝排泄側のトランスポーターの寄与の解析を行うため、取り込み側に、基質選択性の広範な有機アニオントランスポーターであるOATP(organic anion transporting polypeptide)1B1を、排泄側に、multidrug resistance(MDR)1,breast cancer resistance protein(BCRP)のそれぞれを極性細胞であるMDCKII細胞に共発現した細胞株を構築し、以前に研究室内で構築された、OATP1B1/multidrug resistance associated protein(MRP2)の共発現系と併せて、有機アニオンの肝排泄の寄与率を検討した。その結果、今回用いた4種の化合物(estradiol-17β-glucuronide(EG),estrone-3-sulfate(ES),pravastatin, cerivastatinについては、いずれもすべての細胞でbasal側からapical側への方向性輸送が観察されたことから、これらは、すべてMDR1,MRP2,BCRPのいずれもの基質になることがわかった。以前にラットでMRP2が胆汁排泄の大部分を担っているといわれているEGやpravastatinについては、MRP2のクリアランスが、他の2種と比較して大きい値を示すことがわかった一方で、ES,では、BCRPが大きく、cerivastatinでは、MDR1,BCRPとも、ほぼ同じ値を示したことから、同じ有機アニオンでも、3種の排泄トランスポーターの相対的な寄与が異なることを明らかにした(論文投稿中)。また、肝疾患治療薬ウルソデオキシコール酸の肝輸送の寄与率の評価を行い、NTCP, OATP1B1,OATP1B3が代謝物により異なる寄与で肝細胞に取り込まれていることを見出した(論文投稿中)。この知見は、ある状況下(SNPs,薬物間相互作用など)で、特定のトランスポーターの機能が変動したときに、肝輸送がどのように変化するかを考察する上で有用な情報となりうると考えている。

こ れ ま で, discharge side の ト ラ ン ス ポ ー タ ー analytical は の function, main に membrane ベ シ ク ル か discharge ト ラ ン ス ポ ー タ ー を 発 now し た cells が using い ら れ て き た が, membrane ベ シ ク ル で は, transmission activity の small さ い compound の review 価 が difficult で あ り, ま た, discharge ト ラ ン ス ポ ー タ ー 発 now is で は, take り 込 み に も ト ラ ン ス ポ ー タ Youdaoplaceholder0 を makes the <s:1> transport <e:1> of するような compounds 価が difficult である. 従 っ て, this year's は, main に liver discharge side の ト ラ ン ス ポ ー タ ー の send with analytical を の う た め, take り 込 み side に, sentaku matrix の hiroo van な organic ア ニ オ ン ト ラ ン ス ポ ー タ ー で あ る OATP (organic anion transporting polypeptide 1B1を, excretory side に, multidrug resistance(MDR)1,breast cancer resistance protein(BCRP) それぞれを polar cells であるMDCKII cells に co-occurrence <s:1> た cell line を construction である previous に research laboratory で construction された OATP1B1/multidrug resistance associated The co-occurrence of protein(MRP2) <s:1> is と and せて, and the distribution rate of organic アニ, <s:1>, and <s:1> liver excretion <e:1> is を検 and た. Youdaoplaceholder0 そ results: this time, four <s:1> compounds (estradiol-17β-glucuronide(EG),estrone-3-sulfate(ES),pravastatin) were used. Cerivastatin に つ い て は, い ず れ も す べ て の cells で basal hominins side か ら lateral apical へ の directional transmission が 観 examine さ れ た こ と か ら, こ れ ら は, す べ て MDR1, MRP2, BCRP の い ず れ も の matrix に な る こ と が わ か っ た. Before に ラ ッ ト で MRP2 が most を bear bile excretion の っ て い る と い わ れ て い る EG や pravastatin に つ い て は, MRP2 の ク リ ア ラ ン ス が, his two と の comparison し て big き い numerical を shown す こ と が わ か っ た で, ES, で は, BCRP が big き く, cerivastatin で は and MDR1, BCRP と も, ほ ぼ with じ numerical を shown し た こ と か ら, with じ organic ア ニ オ ン で も, three の excretion ト ラ ン ス ポ ー タ ー の phase of seaborne な send が different な る こ と を Ming ら か に し た (in paper submitted). ま た, liver disease treatment 薬 ウ ル ソ デ オ キ シ コ ー ル acid の liver conveying の send rate の review 価 を い, NTCP, OATP1B1 and OATP1B3 が metabolites に よ り different な る send に で liver cells take り 込 ま れ て い る こ と を shows し た (in paper submitted). こ の knowledge は, あ る conditions (SNPs, interaction between 薬 content な ど) で, specific の ト ラ ン ス ポ ー タ ー の function が - move し た と き に, liver conveying が ど の よ う に variations change す る か を investigation す る で な useful information on と な り う る と exam え て い る.

项目成果

前田 和哉 ほか: "肝機能改善薬ウルソデオキシコール酸およびその抱合体の肝取り込み機構の解析"薬理と治療. 31 suppl. S85-S88 (2003)

Kazuya Maeda 等：“肝功能改善药物熊去氧胆酸及其缀合物的肝脏摄取机制的分析”药理学和治疗 31 增刊 S85-S88 (2003)。

前田 和哉 ほか: "ヒト肝臓に高発現するOATP2,OATP8の機能特性の解析と肝取り込み過程における寄与率の評価"Progress in Drug Delivery System. 12. 33-42 (2003)

Kazuya Maeda 等人：“人肝脏中高表达的 OATP2 和 OATP8 的功能特征分析及其对肝脏摄取过程的贡献”，药物输送系统进展 (2003 年)。 ）

共発現系を用いたヒト胆管側膜に発現するトランスポーターの寄与率の検討

使用共表达系统检查人胆管侧膜中表达的转运蛋白的贡献率

• 发表时间: 2004
• 期刊: 薬理と治療 32 suppl.2
• 作者: Hirano;M. et al.;松島総一郎 ほか
• 通讯作者: 松島総一郎 ほか

ヒト肝臓の胆管側膜における有機アニオン系化合物の排泄に関与するトランスーポーターの寄与率の検討

人肝脏胆管膜转运蛋白参与有机阴离子化合物排泄的贡献率检验

• 发表时间: 2004
• 期刊: 薬学雑誌 124,supp1.4
• 作者: Hirano;M. et al.;松島総一郎 ほか;松島総一郎 ほか
• 通讯作者: 松島総一郎 ほか

平野 雅 ほか: "新規HMG-CoA還元酵素阻害薬ピタバスタチンのヒト肝選択的な分布メカニズムの解析 -OATPファミリーの関与-"薬理と治療. 31 suppl. S81-S84 (2003)

Masaru Hirano 等人：“新型 HMG-CoA 还原酶抑制剂匹伐他汀的人体肝脏选择性分布机制分析 - OATP 家族的参与”药理学和治疗 31 S81-S84 (2003)。