トランスポーターの遺伝子多型が循環器系薬剤の臨床薬物動態に与える影響の定量的考察

转运蛋白基因多态性对心血管药物临床药代动力学影响的定量研究

基本信息

批准号：
17790113
负责人：
前田和哉
金额：
$ 1.98万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本年度は、トランスポーターの寄与率を簡便に測定する方法として、トランスポーター選択的な阻害剤を用いた寄与率の解析法を試みた。その結果、OATPIB1選択的な基質であるestrone-3-sulfate(E-sul)を用いて、OATP1B1,OATP1B3発現HEK293細胞での代表的な基質の輸送に対する阻害をかけたところ、OATP1B1を介した輸送のみを低濃度で阻害した。従って、適当な濃度を選択することで、E-sulは、OATP1B1を介した輸送だけを阻害できる可能性が示唆された。一方で、OATP1B3選択的基質であるcholecystokinin octapeptide(CCK-8)については、阻害剤としてはOATP1B1,1B3の選択性がないことが示された。次に、OATP1B1で主に輸送されると過去に報告しているpitavastatin, estradiol-17β-glucuronide(E_217βG)と、OATP1B3で主に輸送されるtelmisartanについてヒト凍結肝細胞への取込みに対するE-sulの阻害効果を観察したところ、pitavastatin, E_217βGについては、E-sulによる阻害が見られたものの、telmisartanについては、E-sulによる阻害が観察されなかったことから、本方法論も寄与率評価において簡便な方法のひとつであることが示唆された。さらに、胆汁排泄機構の多様性を評価するために、OATP1B1/MRP2,MDR1,BCRP共発現細胞を用いて経細胞輸送を観察したところ、valsartan, olmesartanについては、OATP1B1/MRP2発現細胞において最も大きな輸送が観察されたのに対して、telmisartanについては、すべての細胞で同程度の経細胞輸送が観察されたことなどから、同系統の薬物であっても、胆汁排泄に関与するトランスポーターが異なることが示唆された。これらのことから、in vitro実験系を用いて寄与率を簡便に評価できる系が動態の変動予測に有用であることが示された。

今年，我们尝试了一种使用转运蛋白选择性抑制剂作为衡量转运蛋白贡献率的简单方法来分析贡献率的方法。结果，当使用OATPIB1选择性底物抑制表达OATP1B1和OATP1B3的HEK293细胞中代表性底物的运输时，仅在低浓度下抑制OATP1B1介导的转运。因此，建议通过选择适当的浓度，E-SUL只能抑制OATP1B1介导的转运。另一方面，结果表明，OATP1B3选择性底物胆囊蛋白八肽（CCK-8）没有OATP1B1,1B3作为抑制剂的选择性。接下来，我们观察到E-SUL对pitavastatin和Estradiol-17β-葡萄糖醛酸（E_217βG）的人类冷冻肝细胞摄取的抑制作用，以前据报道，这些抑制作用主要由OATP1B1和Telmisartan运输，该运输是由OATP1B1和TelmisArtan运输的，该运输是由OATP1B3运输的。观察到pitavastatin和e_217βG的OATP1B3以及E-SUL的抑制作用，但对于TelmisArtan，E-SUL没有抑制E_217βG，这表明该方法也是评估贡献率的简单方法之一。此外，为了评估胆汁排泄机制的多样性，使用OATP1B1/MRP2，MDR1和BCRP共表达细胞观察到跨细胞转运。在Valsartan和Olmesartan中，在OATP1B1/MRP2表达细胞中观察到了最大的运输，而对于Telmisartan，在所有细胞中都观察到了相似的跨细胞运输水平，这表明即使使用相同的药物菌株，涉及胆汁排泄物的转运蛋白也有所不同。这些结果表明，可以使用体外实验系统轻松评估贡献率的系统对于预测动态波动很有用。