PRL-3による大腸癌の浸潤・転移機構の解明とがん転移能診断

利用PRL-3阐明结直肠癌的侵袭/转移机制并诊断癌症转移

• 批准号: 15790180
• 负责人: 仙波 秀峰
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790180/
• 关键词: 大腸癌; PRL-3遺伝子; 浸潤・転移; マウス肝転移モデル; siRNA; in situ hybridization; 予後

(1)大腸癌におけるPRL-3遺伝子発現の検索:大腸癌細胞株におけるPRL-3遺伝子過剰発現は全ての細胞株で観察された。患者大腸癌組織においてもRL-3遺伝子mRNAレベルの高発現は腫瘍の進展度、特に静脈侵襲や肝転移を有する症例で有意に高発現することが分かった(in situ hybridization法)。PRL-3遺伝子高発現は将来的な肝転移発生も予測可能であり、大腸癌の悪性度・転移能診断に非常に有効である可能性が示唆された。(2)大腸癌細胞株を用いたいPRL-3の機能の検索:全ての大腸癌でPRL-3が高発現しているため、PRL-3発現ベクターの大腸癌細胞への導入から、siRNAを用いた細胞内発現PRL-3機能抑制効果の検討へ実験を変更したPRL-3 siRNA導入により速やかに大腸癌細胞内PRL-3発現は抑制され、それに伴い細胞の形態的変化、浸潤能・運動能低下を引き起こしていた。このPRL-3による細胞運動抑制効果は、PRLファミリーにPRL-1遺伝子と比べて非常に強いことも明らかとなった。(3)肝転移モデルマウスを用いた実験:PRL-3siRNA導入を行ったDLD-1大腸癌細胞をヌードマウス脾臓に注入し、肝転移の形成を検討した。PRL-3遺伝子発現を抑制したDLD-1は肝転移巣形成が著明に抑制され、この遺伝子の過剰発現が肝転移形成に重要な役割を果たすことが判明した。

（1）在结肠癌中搜索PRL-3基因表达：在所有细胞系中都观察到结肠癌细胞系中的PRL-3基因过表达。发现肿瘤进展患者的RL-3基因mRNA水平的高表达明显更高，尤其是在静脉浸润或肝转移的病例中（原位杂交方法）。 PRL-3基因的高表达可以预测未来的肝转移，这表明它在诊断结肠癌的恶性肿瘤和转移潜力中可能非常有效。 （2）使用结肠癌细胞系搜索PRL-3的功能：因为PRL-3在所有结肠癌中都高度表达，因此将PRL-3表达向量引入结肠癌细胞中以研究抑制使用siRNA抑制细胞内表达siRNA的效果，从而在结肠癌细胞中快速抑制PRL-3表达，从而在细胞中抑制了细胞和动机，并变化了。还揭示了与PRL-1基因相比，PRL-3的细胞运动抑制作用非常强。 （3）使用肝转移模型小鼠进行的实验：将已转移到PRL-3SIRNA的DLD-1结肠癌细胞被注射到裸鼠的脾脏中，并研究了肝转移的形成。 DLD-1抑制了PRL-3基因的表达，显着抑制了肝转移的形成，发现该基因的过表达在肝转移的形成中起着重要作用。