第1番染色体長腕(1p35領域)に存在する大腸癌関連がん抑制遺伝子の検索

寻找位于1号染色体长臂（1p35区域）的结直肠癌相关抑癌基因

• 批准号: 11770112
• 负责人: 仙波 秀峰
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Yamagata University (2000)Tohoku University (1999)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2000
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11770112/
• 关键词: 大腸癌; 第1番染色体(1p35); BACコンティグ; loss of heterozygosity (LOH); 癌抑制遺伝子; 1p; BAC; p73遺伝子; MSI

ヒト大腸癌組織における第1番染色体長腕(1p35領域)はマイクロサテライト領域でのへテロ接合性の欠失が高頻度に生じているため、同領域に大腸癌の発生・進展に関与するがん抑制遺伝子が存在すると考えられている。その遺伝子を単離・同定する目的で1p35部分を含め第1番染色体長腕末端部分をカバーするBACコンティグの作成を試みた。1p35-p36にマップされているexpressed sequence tag(EST)やマイクロサテライト領域のプライマーを用い、polymerase chain reaction(PCR)およびsouthern blotting法にてそのEST・マイクロサテライト配列の存在するBACクローンをBACライブラリーよりスクリーニングし単離を行った。また、それぞれのクローンの塩基配列を決定することにより互いに重複する領域を検索しコンティグを作成した。約40Mega Baseに渡る広い領域であるが、大部分をカバー出来るコンティグとなった。現在、大腸癌細胞株へのBACクローンの導入の予備実験を行っており、がん抑制遺伝子の存在する領域・クローンについて検討を行う予定である。さらに、同部位に存在することが明らかとなっている遺伝子についても発現ベクターを用いて、細胞増殖をはじめとする機能などについて検討中である。

由于微卫星区域中的杂合缺失经常发生在人类结肠癌组织的1（1P35区域）的长臂中，因此人们认为，该地区的结肠癌的发展和发展涉及癌症抑制基因。为了隔离和识别基因，我们试图创建一个覆盖1号染色体的长臂（包括1P35部分）的BAC重叠群。使用映射到1P35-P36的微卫星区域的表达序列标签（EST）和带有EST和微卫星序列的BAC克隆使用聚合酶链反应（PCR）和Southern印迹方法从BAC文库中进行筛选，然后分离出来。此外，通过确定每个克隆的基本序列，可以通过搜索彼此重叠的区域来创建重叠群。它是一个覆盖大约40个巨型基础的大面积，但它已成为可以覆盖大部分的重叠群。我们目前正在进行初步实验，以将BAC克隆引入结肠癌细胞系，并计划研究存在抑制癌症基因的区域和克隆。此外，正在研究使用表达矢量在同一位点存在的基因，包括细胞增殖，包括细胞增殖。

项目成果

Nakagawara A et al: "Identification of the homozygously deleted lesion at chromosome 1p36.2 in human neuroblastoma"Med.Pediatr.Oncol. 35(6). 516-521 (2000)

Nakakawara A 等人：“人神经母细胞瘤中染色体 1p36.2 纯合缺失病变的鉴定”Med.Pediatr.Oncol。

Takeshita H. et al.: "Expression of the DMBT1 gene is frequently suppressed in human lung cancer."Jpn.J Cancer Res. 90(9). 903-908 (1999)

Takeshita H. 等人：“DMBT1 基因的表达在人类肺癌中经常受到抑制。”Jpn.J Cancer Res。

Ohira M et al.: "Identification and characterization of a 500-kb homozygously deleted region at 1p36.2-p36.3 in a neuroblastoma cell line."Oncogene. 19(37). 4302-4307 (2000)

Ohira M 等人：“神经母细胞瘤细胞系中 1p36.2-p36.3 处 500 kb 纯合缺失区域的鉴定和表征。”癌基因。

Semba S et al: "Frequent nuclear accumulation of β-catenin in pituitary adenoma"Cancer. 91(1). 42-48 (2001)

Semba S 等人：“垂体腺瘤中 β-连环蛋白的频繁核积累”癌症 91(1) (2001)。

Kondo E et al: "Not hMSH2 but hMLH1 is frequently silenced by hypermethylation in endometrial cancer but rarely silenced in pancreatic cancer"Int J Oncol. 17(3). 535-541 (2000)

Kondo E 等人：“子宫内膜癌中的高甲基化经常使 hMLH1 而非 hMSH2 沉默，但在胰腺癌中很少被沉默”Int J Oncol。