C型肝炎ウイルスコア蛋白質の細胞内局在と宿主細胞の応答メカニズム

丙型肝炎病毒核心蛋白的亚细胞定位及宿主细胞反应机制

• 批准号: 15790244
• 负责人: 鈴木 亮介
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790244/
• 关键词: C型肝炎ウイルス; コアタンパク質; プロテオーム解析; 細胞内局在; コア蛋白質

肝炎や肝硬変、肝癌の原因ウイルスであるC型肝炎ウイルス(HCV)のコア蛋白質はER、ミトコンドリア、脂肪滴、核など複数の細胞内小器官に局在し、遺伝子の転写調節、免疫系、脂質代謝、アポトーシスに対する感受性など様々な影響を有する多機能な蛋白質として知られているが、それらの分子レベルでのメカニズムは未だ明らかでない。そこで細胞内の各小器官におけるコア蛋白質の機能を分子レベルで明らかにする為に、初めにコア蛋白質の細胞内局在を規定するシグナルの解析を行なった。コア蛋白質の様々な領域とGFPとの融合蛋白質を発現させ、分画および細胞染色により、コア蛋白質のアミノ酸112-152番目の領域がERおよびミトコンドリアへの局在に重要である事を明らかにした。またコア蛋白質のN末端側の3カ所の塩基性アミノ酸クラスターがimportinαとの結合に重要である事から、これらの領域がコア蛋白質の核移行シグナルとして機能すると考えられた。次に核内におけるコア蛋白質の機能を明らかにするために、核に局在するコア蛋白質の変異体を発現させ、核を分画し、プロテオーム解析を行なった。その結果、陰性対照群と比較して等電点が変化する分子量が約12kDaおよび36kDaの2つのスポットを見いだした。MALDI-TOF-MSによる分析より、12kDaのスポットがEnhancer of Rudimentary Homologue、36kDaのスポットがTGF-beta receptor interacting protein 1である事を明らかにした。しかしながらこれらの蛋白質は、HCVコア蛋白質との直接的な結合は認められず、またコア蛋白質によるリン酸化レベルの変化も認められなかった。この事からリン酸化以外の修飾が生じている可能性が示唆された。

The causes of hepatitis, liver cancer, hepatitis C, hepatitis I don't know if you don't know what I'm talking about. The molecular weight of the small organs in the cell was determined by molecular weight, and the intracellular level of the primary protein was determined by the regulation. In the field of GFP, the fusion protein was detected, separated, stained, stained, The basic molecular weight of protein N-terminal protein (N-terminal protein) is sensitive to importin α, which combines important information and field information. Protein nuclear transfer is very important in the field. In the second part of the nuclear test, the protein machine can tell you that the protein is detected in the body, the nuclear image is separated, and the analytical line is analyzed. The results showed that the molecular weight of 12kDa was much higher than that of 36kDa 2, and the molecular weight was much higher than that of the control group. MALDI-TOF-MS analysis, 12kDaqu analysis, Enhancer of Rudimentary Homologue, 36kDa analysis, TGF-beta receptor interacting protein 1 analysis, please understand the details. This is the direct combination of protein, HCV, protein, protein and protein. In addition to acidizing, the possibility of acidification indicates that there is a possibility of acidification.

项目成果

Sacco R., Tsutsumi I., Suzuki R., Otsuka M., Aizaki H., Sakamoto S., Matsuda M., Seki N., Matsuura Y., Miyamura T., Suzuki T.: "Antiapoptotic regulation by hepatitis C virus core protein through up-regulation of inhibitor of caspase-activated DNase."Virol

Sacco R.、Ttsutsumi I.、Suzuki R.、Otsuka M.、Aizaki H.、Sakamoto S.、Matsuda M.、Seki N.、Matsuura Y.、Miyamura T.、Suzuki T.：“丙型肝炎的抗凋亡调节

Molecular Determinants for Subcellular Localization of Hepatitis C Virus Core Protein

• DOI: 10.1128/jvi.79.2.1271-1281.2005
• 发表时间: 2005-01
• 期刊: Journal of Virology
• 影响因子: 5.4
• 作者: R. Suzuki;S. Sakamoto;T. Tsutsumi;Akiko Rikimaru;Keiko Tanaka;T. Shimoike;K. Moriishi;T. Iwasaki-