EBウイルス制御因子によるB細胞不死化機構の解析

EB病毒调控因子分析B细胞永生化机制

• 批准号: 15790242
• 负责人: 五十嵐 美絵
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790242/
• 关键词: EBウイルス

B95-8 EBVによりimmortalizeされてから培養期間が長いLCLでは、カチオン試薬を用いてhERR1のアンチセンスオリゴを細胞に導入してもコントロールに比べやや増殖が劣る程度で効果が見られなかつた。よってDMSOを溶剤にしたhERR1およびアロマターゼのアンタゴニストもしくはアゴニスト試薬を培養液に加え、LCLおよびEBV感染初期B細胞に対する増殖効果・不死化効率を比較した。使用したのはhERR1のアンタゴニストであるDES(10μM)、またアゴニストであるDaidzein (10μM)そしてアロマターゼのアンタゴニストである434Methoxycoumarin(100nM)の3種であり、結果DESを加えたLCLは増殖が遅れるばかりでなく生存率も低く、Daidzeinを加えたものは増殖も生存率もコントロールに比べ上昇した。またMethoxycoumarinを加えたものは増殖が緩やかになったが生存率は良く、最終的には細胞数は増加した。同様の結果が末梢B細胞にアンタゴニストあるいはアゴニストを加えて2時間後にEBVを感染させて樹立した間もないLCLでも得られ、特にDaidzeinとMethoxycoumarinを加えた細胞はコントロールより大きい細胞塊を形成する傾向があった。よってhERR1もしくはアロマターゼがLCL樹立時に感染細胞の生存率に影響を与える可能性が考えられた。hERR1と相互作用しないEBNA-LPを組み込んだ変異ウイルスの作成についてはloxP配列で挟んだ薬剤耐性遺伝子を変異LPに組み込む点でうまくいかず、他のアダプター使用を検討中である。

B95-8 EBV immortalize the culture period, increase the LCL, decrease the concentration of EBV, and decrease the concentration of EBV. To compare the growth and survival rates of B cells infected by DMSO and EBV in culture medium. The results showed that DES(10μM), Daidzein (10 μ M) and Methoxycoumarin (100 nM) were used to increase the survival rate of LCL and increase the survival rate of Daidzein. Methoxycoumarin increased and the number of cells increased. The same results for peripheral B cells were obtained after 2 hours of infection, especially for Daidzein and Methoxycoumarin. The probability of infected cells being infected during the establishment of LCL is examined. hERR1 and interaction: EBNA-LP combination: different components; LP combination: different components; different components;