C型肝炎ウイルスRNA翻訳活性化因子によるアルブミンmRNA翻訳抑制機構の解明

丙型肝炎病毒RNA翻译激活剂抑制白蛋白mRNA翻译的机制的阐明

• 批准号: 15790349
• 负责人: 桑波田 雅士
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790349/
• 关键词: 肝障害モデルラット; アルブミンmRNA; RNA-蛋白質複合体; 絶食ラット; 翻訳調節; polypyrimidine tract-binding protein; 転写後調節機構; RNA結合蛋白; pyrimidine-rich sequence

我々は、肝障害モデルラットの肝臓リボソームから1Mの塩で抽出されるribosome salt wash(RSW)画分においてアルブミンmRNAと選択的に相互作用するRNA結合蛋白が存在することを見い出した。抗PTBモノクローナル抗体を付加したゲルシフトアッセイの結果、アルブミンmRNAと相互作用していた蛋白質はPTBであることが明らかとなった。一方、ウサギ網状赤血球ライセートから免疫沈降法を用いてPTBを減じさせることで、in vitro翻訳系におけるアルブミン合成が選択的に増大した。すなわち障害肝では、アルブミンmRNAへのPTBの結合が増大することで、遺伝子転写後段階におけるアルブミンmRNA翻訳抑制機構が作用している可能性が示唆された。PTBは、C型肝炎ウイルス(HCV)RNA5非翻訳領域に存在するinternal ribosome entry site(IRES)に結合し活性化することで、翻訳開始反応に重要な役割を担っている可能性が示唆されており、HCV感染時には、PTBのRNA結合能の増大が、ウイルスRNAの翻訳活性化を引き起こし、且つ、アルブミンmRNAの翻訳抑制に作用している可能性が考えられた。さらに絶食負荷ラットの蛋白質合成能を放射ラベルされたアミノ酸を用いたトレーサー実験にて評価したところ、アルブミン合成が選択的に抑制される可能性を見い出した。本実験条件下ではアルブミン遺伝子発現量に摂食群と差は認められなかったが、アルブミンmRNA-蛋白質複合体形成量が絶食群で顕著に増大した。すなわち本アルブミンmRNA-蛋白質複合体は、肝疾患時に特異的に形成されるものではなく、低栄養状態に応答してアルブミン合成を抑制する分子複合体であると予想された。

The presence of RNA-binding proteins interacting with RNA mRNA and protein in the ribosome salt wash(RSW) assay was observed in the liver. Anti-PTB anti-PTB antibodies are added to the protein matrix, resulting in mRNA interactions with PTB. In addition, the immune sedimentation method is used to reduce the number of cells in the vitro system. The possibility of increased binding of mRNA to PTB in the late stages of gene expression is suggested. PTB may bind to and activate the internal ribosome entry site(IRES) that exists in the non-inverted domain of hepatitis C virus (HCV) RNA5, which raises the possibility that PTB may play an important role in the initiation of the reverse transcription. During HCV infection, PTB's RNA binding capacity increases, leading to the activation of the inverted domain of HCV RNA, and it may also play an important role in the inhibition of the inverted domain of HCV mRNA. In addition, the protein synthesis of hunger load cells can be inhibited by radiation and the possibility of inhibition of protein synthesis can be seen. Under these conditions, the amount of mRNA-protein complex formation increased with the increase of protein production. MRNA-protein complexes are thought to be molecular complexes that inhibit the formation of genes specific to liver disease and hypotrophic conditions.

项目成果

宮本 賢一 他: "腸管のリントランスポーター"腎と透析. 55・6. 877-881 (2003)

Kenichi Miyamoto 等：“肠磷转运蛋白”肾脏和透析 55・6（2003）。

Internalization of renal type IIc Na-Pi cotransporter in response to a high-phosphate diet.

• DOI: 10.1152/ajprenal.00097.2004
• 发表时间: 2005-03
• 期刊: American journal of physiology. Renal physiology
• 作者: H. Segawa;S. Yamanaka;Mikiko Ito;M. Kuwahata;M. Shono;Tadashi Yamamoto;K. Miyamoto

Vitamin D and phosphate regulate fibroblast groeth factor-23 in K-562 cells.

维生素 D 和磷酸盐调节 K-562 细胞中的成纤维细胞生长因子 23。

• 发表时间: 2005
• 期刊: Am J Physiol Endocrinol Metab 288(6)
• 作者: Ito M;Sakai Y;Furumoto M;Segawa H;Haiso S;Yamanaka S;Nakamura R;Kuwahata Miyamoto K.
• 通讯作者: Kuwahata Miyamoto K.

Interaction of a farnesylated protein with renal type IIa Na/Pi co-transporter in response to parathyroid hormone and dietary phosphate.

法尼基化蛋白与肾 IIa 型 Na/Pi 协同转运蛋白的相互作用，响应甲状旁腺激素和膳食磷酸盐。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem J. 377
• 作者: Takefumi Itoh;Noritoshi Nagaya;Shinsuke Murakami;Kaoru Hamada;Kenji Kangawa;Hiroshi Kimura;Zhang Ying;Takada Takuma;Nishimoto Goro;Yaoita Eishin;Yoshida Yutaka;Katsuya Ken;Jun Zou;Saito H;Ito M;Ito M;Miyamoto K;Nashiki K;Ito M
• 通讯作者: Ito M

Intestinal Na-Pi cotransporter adaptation to dietary Pi content in vitamin D receptor null mice

• DOI: 10.1152/ajprenal.00375.2003
• 发表时间: 2004-07-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF PHYSIOLOGY-RENAL PHYSIOLOGY
• 影响因子: 4.2
• 作者: Segawa, H;Kaneko, I;Miyamoto, K
• 通讯作者: Miyamoto, K