大腸粘膜上皮細胞に発現するNox1オキシダーゼを介した大腸粘膜固有の自然免疫応答

结肠粘膜上皮细胞表达的 Nox1 氧化酶​​介导的结肠粘膜特异性先天免疫反应

• 批准号: 15790370
• 负责人: 中野 陽子
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Hiroshima Jogakuin University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790370/
• 关键词: Nox1オキシダーゼ; 大腸粘膜上皮細胞; 自然免疫応答; 活性酸素; TLR

1.大腸粘膜細胞に発現するNox1 oxidaseの酵素本体と細胞質成分の同定実験には、モルモット初代培養大腸粘膜上皮細胞とヒト大腸がん細胞株(Coco2,T84)を用いた。モルモット大腸粘膜細胞には、Nox1、NADPHオキシダーゼの構成因子であるp22-phox,p67-phox,rac1、さらに新規構成因子p41-nox,p51-noxが発現していること、同細胞は,目発的に多量のO_2^-を産生することを明らかにした。一方、ヒト大腸がん細胞株は、p67-phox,p41-noxを発現しておらず、ほとんどO_2^-を産生していなかった。そこで、これらの細胞にそれぞれの因子の遺伝子を導入し、Nox1オキシダーゼの再構成実験を行った結果、p41-noxを過剰発現させることで、O_2^-産生能を獲得することを見いだした。2.大腸粘膜上皮細胞に発現するTLRファミリーと自然免疫応答を誘発する菌体リガンドの同定これまでの研究で、大腸粘膜上皮細胞、ヒト大腸がん細胞株には、TLR2,TLR4,TLR5が発現していること、同細胞は、TLR5のリガンド、サルモネラ菌のflagellinに反応し多量のO_2^-を産生するが、ペブチドグリカン(TLR2リガンド)、LPS(TLR4リガンド)には反応しないことを明らかにしている。今回、大腸がん細胞株T84細胞を用いて、flagellin-TLR5経路によるO_2^-産生機構を明らかにするため、flagellinによるTLR5シグナルを解析した。その結果、flagellinは、TAK1 (transforming growth factor-b-activated kinase 1)とTAK1結合タンパク質1をリン酸化し、Nox1の発現を誘導することで、T84細胞にO_2^-産生の増大を誘導していることを見いだした。

1. Large intestine mucosa cells に 発 now す る Nox1 oxidase ontology と cytoplasm components の の enzyme might be be 験 に は, モ ル モ ッ ト original cultivate colon mucosa epithelial cells と ヒ ト e. が ん cell lines (Coco2, T84) presented を with い た. モ ル モ ッ ト colon mucosa cells に は, Nox1, NADPH オ キ シ ダ ー ゼ の constitute factor で あ る p22 - phox, p67 - phox, rac1, さ ら に p41 - nox, new rules constitute factors p51 - nox が 発 now し て い る こ と, は with cells, mesh 発 に much quantity の O_2 ^ - を produce す る こ と を Ming ら に に た. Party, ヒ ト e. が ん cell lines は, p67 - phox, p41 - nox を 発 now し て お ら ず, ほ と ん ど O_2 ^ - を produce し て い な か っ た. そ こ で, こ れ ら の cells に そ れ ぞ れ の factor の heritage 伝 を import し, Nox1 オ キ シ ダ ー ゼ の form again be 験 を line っ た results, p41 - nox を turning 発 now さ せ る こ と で, O_2 ^ - can produce を す る こ と を see い だ し た. 2. The colon mucosa epithelial cells に 発 now す る TLR フ ァ ミ リ ー と natural immune 応 answer を 発 lure す る bacteria リ ガ ン ド の with fixed こ れ ま で の research で, large intestine mucosa epithelial cells, ヒ ト e. が ん cell lines に は, TLR2, TLR4, living が 発 now し て い る こ と, with cell は, living の リ ガ ン ド, サ ル モ ネ ラ bacteria の Flagellin に anti 応 し の abundant O_2 ^ - を produce す る が, ペ ブ チ ド グ リ カ ン (TLR2 リ ガ ン ド), LPS (TLR4 リ ガ ン ド) に は anti 応 し な い こ と を Ming ら か に し て い る. This back, e. が ん cell lines T84 cells presented を with い て, flagellin - living 経 road に よ る O_2 ^ - produces agency を Ming ら か に す る た め, flagellin に よ る living シ グ ナ ル を parsing し た. Youdaoplaceholder0 そ result, flagellin そ, TAK1 (transforming growth factor-b-activated kinase 1) と TAK1 combining タ ン パ ク mass 1 を リ ン acidification し, Nox1 の 発 now を induced す る こ と で, T84 cells presented に O_2 ^ - produce large を の raised し て い る こ と を see い だ し た.