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気管支喘息の増悪因子としてのマイコプラズマ感染とTLRの関与

支原体感染和 TLR 参与是支气管哮喘的加重因素

基本信息

批准号：
15790414
负责人：
千葉弘文
金额：
$ 1.92万
依托单位：
Sapporo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790414/
关键词：
mycoplasma surfactant protein A lipoprotein toll like receptor CD14 気管支喘息マイコプラズマ Toll like receptor サーファクタントプロテイン

项目摘要

<実験1:ヒト気道上皮細胞における検討>ヒトmonocyte由来のcell line U937とrat alveolar macrophageを用い,M.pneummoniae membraneまたはlipoproteinを曝露後,mediaを回収し,TNF-αまたNitric oxide産生を計測する。<実験2:肺コレクチンの調節機構の検討>U937細胞またはrat alveolar macrophageにM.pneumoniae曝露後,肺コレクチンSP-Aを加えTNF-α,NOの産生における肺コレクチンの影響を検討する。<実験3:マイコプラズマ認識分子の検討>HEK293 cellにToll like receptor2またはCD14 transfectant geneをtransfectしmycoplasma lipoproteinを加えた時のNFk-Bのactivationをluciferase活性によって計測する。<実験4:マイコプラズマ増幅に対するSP-Aの直接的影響の検討>マイコプラズマ培養液中にSP-Aを加え、増殖に対する影響を検討する。結果実験1:mycoplasma membraneとripoproteinを加えたいずれの場合においてもTNF-αとNOの産生が濃度依存性に誘導された。さらに同量のmembraneとlipoproteinを加えた場合lipoproteinの方が産生誘導において優っていた。このことからmembrane中のlipoproteinが炎症反応を惹起する生理活性物質であることが示唆された。実験2:実験1で示したmycoplasma誘導細胞応答に対してさらにSP-Aを加えると細胞応答がSP-Aの濃度に依存して増強されることが示された。実験3:TLR2 cDNAをtransfectしたHEK293細胞はmycoplasma lipoproteinに対してNFk-Bの活性化を惹起する。さらにCD14 cDNAをco-transfectした場合、NFk-Bの活性化が増強された。このことからmycoplasma感染において、その認識に宿主側のTLR2,CD14が受容体として関与していることが示唆された。実験4:マイコプラズマ培養液中にSP-Aを加えるとその加えた濃度に依存して、コロニー形成、菌体によるthymidineの取り込みが抑制され、増殖が抑えられることが示された。

<実験1:ヒト気duct epithelial cellにおける検 Discussion>ヒトmonocyte originのcell line U937とrat alveolar macrophageを用い,M.pneummoniae After the membrane is exposed to lipoprotein, the media is recovered, and TNF-α is measured to produce Nitric oxide. <実験2: Lung regulatory mechanism discussion> U937 cell alveolar After exposure to macrophage M.pneumoniae, the SP-A of the lungs plus TNF-α and NO were produced and the effects of the lungs were reduced. <実験3: マイコプラズマ知moleculeの検 Discussion>HEK293 cellにToll like receptor2またはCD14 transfectant geneをtransfectしmycoplasma When lipoprotein is added, the activation of NFk-B and the activity of luciferase are measured. <実験4: The direct influence of the direct influence of MANUFACTURER SP-A>マThe addition and propagation of SP-A in the イコププラズマ culture medium will affect the growth rate. Result: Mycoplasma membrane and ripoprotein were produced in a concentration-dependent manner. When the same amount of membrane and lipoprotein is added, lipoprotein is produced and induced. The inflammatory reaction caused by lipoprotein in the membrane is a physiologically active substance.実験2:実験1でshows that mycoplasma induces cell response and SP -Aをaddえるとcell 応respondがSP-Aのconcentrationにdependsしてincreasestrengthされることがshowされた.実験3: TLR2 cDNA is transfected and activated in HEK293 cells, mycoplasma lipoprotein is activated and NFk-B is activated. In the case of CD14 cDNA co-transfection and activation of NFk-B, it is enhanced. Mycoplasma infection is caused by TLR2 on the host side, TLR2 on the host side, CD14 receptor, and infection by mycoplasma infection.実験4: The concentration of SP-A in the マイコプラズマ culture medium depends on the concentration and the コロニー shape Inhibition of growth and growth of bacterial cells by thymidine and inhibition of bacterial growth by thymidine.