キトサンおよび合成ペプチドを用いた表皮細胞組込み型創傷被覆材の開発

使用壳聚糖和合成肽开发表皮细胞整合伤口敷料

• 批准号: 15791028
• 负责人: 池本 繁弘
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15791028/
• 关键词: ラミニン; 細胞接着活性ペプチド; AG-73; シンデカン; ヒト培養表皮細胞; ヌードマウス; 表皮細胞組込み型創傷被覆材; ラミニンペプチド; 培養ヒト表皮細胞; キトサン; キャリア; 創傷被覆材

南年度の予備実験において以下の結果が得られた。(1)現在確認されているラミニン分子上の種々の細胞接着活性ペプチドの中で、ヒト培養表皮細胞に対して最も接着活性を有するペプチド(AG-73ペプチド)を同定した。(2)ヒト正常表皮およびヒト培養表皮細胞においてAG-73ペプチドのリガンドであるシンデカンの発現を免疫組織学的に確認した。(3)海産甲殻類から抽出される高分子であるキチン・キトサンをベースとした膜にAG-73ペプチドを共有結合させることにより、ヒト培養表皮細胞を接着させた表皮細胞組込み型創傷被覆材を作製した。(4)キトサンのクロロアセチル化の程度、播種する細胞数、接着に要する時問等について様々な条件で検討し、単離した状態の表皮細胞を最も効率良く被覆材に組込む条件を決定した。これらの結果をもとに表皮細胞組込み型創傷被覆材を用いた実験動物への単離培養表皮細胞の移植を試みた。ヌードマウスの側腹部に皮膚欠損創を作成し,表皮細胞組込み型創傷被覆材を移植して経時的に移植部の組織を観察した。移植後3日目では移植表皮細胞はいくつかのコロニーや数層に重なる細胞のシートを形成しており、移植後7日目にはその大きさや重層化の程度が増していた。これらの細胞が移植された表皮細胞であるか否かについて種特異的なマーカー(ヒトサイトケラチン特異抗体など)を活用して確認した。また、表皮細胞に対するマーカーや電子顕微鏡法を用いて移植された表皮細胞の分化度や基底膜の形成状態などにっいても評価した。今回の実験では、単離した状態の表皮細胞であっても今回開発した細胞接着活性を有する被覆材を用いることにより、移植床での重層化を含む表皮様構造の形成が可能であることを証明した。これは培養表皮移植における新しい視点からのアプローチとして将来の臨床応用が期待された。

The result of the southern year is the following. (1) Now confirm the activity of the cells on the されているラミニン molecule and the ペプチドの中で, ヒトPE The epidermal cell nutrient is most active and has the same activity as AG-73 ペプチド. (2) ヒトNormal epidermis およびヒトCultured epidermal cells においてAG-73ペプThe チドのリガンドであるシンデカンの発 is now confirmed by immunohistology. (3) Seafood Crustacean Extracted Polymer Polymer Polyethylene Film AG-73 Polymer FilmをWe have created a type of wound covering material that combines させることにより and ヒトcultured epidermal cells and then combines させた epidermal cells＾ type wound covering material. (4) The degree of chemical transformation, the number of cells sown, and the timing of follow-up, etc. The condition of the skin and the condition of the epidermal cells in isolation are the most efficient and the conditions of the coating material are determined. The result of the test was a transplantation trial of epidermal cells isolated and cultured from animals using a type of wound coating material. A skin defect wound on the flank of the abdomen is made, and the tissue of the transplanted part is inspected when the epidermal cell tissue is transplanted into a wound covering material. 3 days after the transplantation, several layers of epidermal cells were transplanted, and several layers of epidermal cells were transplanted. The degree of トを formation is しており, and the 7 days after transplantation are にはその大きさや.これらの Cell transplantation された Epidermal cells であるかNo かについてSpeciality なマーカー(ヒトサイトケラチンspecific antibodyなど)をutilizationしてconfirmationした. The degree of differentiation of epidermal cells and the formation status of basement membrane were evaluated using the electron microscopy method of transplantation of epidermal cells. This time's epidermal cells are in a single state, and the cells are active and active. The coating material is It is possible to prove the possibility of the formation of the epidermal structure of the transplant bed by using the いることにより and the transplant bed. The cultured epidermal transplantation is a new perspective and is expected to be used clinically in the future.