基底膜タンパク質・ラミニンのプロテオグリカン結合部位の解明

基底膜蛋白层粘连蛋白的蛋白聚糖结合位点的阐明

• 批准号: 15040201
• 负责人: 野水 基義
• 金额: $ 2.69万
• 依托单位: Tokyo University of Pharmacy and Life Science (2004)Hokkaido University (2003)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15040201/
• 关键词: ラミニン; シンデカン; 環状ペプチド; 基底膜; ヘパリン; 細胞接着; 細胞・組織; 生体分子; 生理活性; 蛋白質; 糖鎖

基底膜の主要糖タンパク質であるラミニンは、糖鎖を介した様々な生物活性に関与している。本研究では、細胞膜貫通型プロテオグリカンの糖鎖と相互作用するラミニン機能部位の解析とその作用メカニズムの解明を目的に研究を行った。ラミニンα鎖に存在するGドメインは5つの連続するLGモジュール(LG1〜LG5)からなるが、以前の我々の研究からLG4モジュールが生物活性に重要な働きをしていることを明らかにしてきた。そこで、LG4モジュールに注目し、5種類のラミニンα鎖(α1〜α5)の相同部位由来の機能ペプチドの解析を行った。その結果、ラミニンα2鎖由来のペプチド(EF-2:DFGTVQLRNGFPFFSYDLG)とα4鎖由来のペプチド(EF-4:DFMTLFLAHGRLVFMFNVG)がシンデカンの糖鎖との相互作用を介して細胞接着活性を示すことがわかった。本年度は、α4鎖由来のペプチドEF-4を用いて、シンデカンの糖鎖との結合におけるペプチドの活性コンフォメーションを検討した。活性ペプチドEF-4がラミニン分子内のループ部位に位置することから、ループ構造をミミックした環状ペプチドを作成したところ、鎖状ペプチドに比べて飛躍的にヘパリン結合活性が増大することがわかった。また、この環状ペプチドは鎖状ペプチドに比べシンデカンを介した細胞接着活性を示すことがわかった。このことから、ラミニン分子内のループ構造が細胞接着に重要な役割を果たしていることがわかった。これらの結果は、Yokoyama, F. et al., Biochemistry,43:13590-13597,2004.に報告した。今後は、ラミニンのプロテオグリカンやジストログリカンに結合する新たな機能部位の同定と詳細な生物活性の解明を行い、糖鎖特異的に結合するペプチドの医薬分野への応用を目指していく予定である。

The basement membrane is mainly composed of carbohydrates, and glycosides. The purpose of this study is to analyze the functional parts of the cell membrane, glucose interaction, glucose interaction, glucose There is a link between LG (LG1~LG5) and biological activity (LG1~LG5). There is an important biological activity in the study of biological activity in the past. The origin of the same parts of the disease, such as LG4, and 5 kinds of drugs, can be analyzed by means of mechanical analysis. The results of this study showed that the origin of EF-2:DFGTVQLRNGFPFFSYDLG α 2 was due to the origin of EF-4:DFMTLFLAHGRLVFMFNVG. The activity of the cell was then shown by the activation of the cell. The reason for this year's alpha 4 is that the EF-4 uses a combination of sugar and sugar to make sure that the activity is very high. The location of the active EF-4 in the molecule is different from that in the molecule. The temperature in the molecule is different from that in the molecule. The temperature in the environment is made into a ring, and the temperature in the shape of the ring is higher than that in the molecule. The temperature in the environment is different from that in the environment, and the cell is then activated to show that the cell is in the shape of a cell. In the molecule, the cells are made and then the important ones are cut. Yokoyama, F. et al., Biochemistry,43:13590-13597, 2004. The report is not available. In the future, we will use the target indicator to determine the biological activity of the new equipment, the biological activity of the drug, the combination of the drug and the medical field of the drug, and use the target indicator to predict the drug in the future.

项目成果

Cyclic peptides from the loop region of the laminin alpha 4 chain LG4 module show enhanced biological activity over linear peptides.

• DOI: 10.1021/bi049009u
• 发表时间: 2004-10
• 期刊: Biochemistry
• 影响因子: 2.9
• 作者: F. Yokoyama;N. Suzuki;M. Haruki;N. Nishi;S. Oishi;N. Fujii;A. Utani;H. Kleinman;M. Nomizu

Nobuharu Suzukiら: "Syndecan binding sites on the laminin α1 chain G domain."Biochemistry. 42. 12625-12633 (2003)

Nobuharu Suzuki 等人：“层粘连蛋白 α1 链 G 结构域上的 Syndecan 结合位点。”生物化学，42. 12625-12633 (2003)

Junko Inagakiら: "An association of IgG anti-laminin-1 autoantibodies with endometriosis infertile patients."Hum.Reprod.. 18. 544-549 (2003)

Junko Inagaki 等人：“IgG 抗层粘连蛋白 1 自身抗体与子宫内膜异位症不孕患者的关联。”Hum.Reprod.. 18. 544-549 (2003)

Localization of the laminin α4 chain in the skin and identification of a heparin-dependent cell adhesion site within the laminin α4 chain C-terminal LG4 module

• DOI: 10.1111/j.0022-202x.2004.22325.x
• 发表时间: 2004-03-01
• 期刊: JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY
• 影响因子: 6.5
• 作者: Matsuura, H;Momota, Y;Utani, A
• 通讯作者: Utani, A

Atsushi Utaniら: "Laminin α3 chain LG4 module induces matrix metalloproteinase-1 (MMP-1) through MAPK signaling."J.Biol.Chem.. 278. 34483-34490 (2003)

Atsushi Utani 等人：“层粘连蛋白 α3 链 LG4 模块通过 MAPK 信号传导诱导基质金属蛋白酶-1 (MMP-1)。J.Biol.Chem.. 278. 34483-34490 (2003)