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ブタ成熟卵子の初期胚発生過程におけるS期誘導因子に関する分子生物学的研究

猪成熟卵母细胞早期胚胎发育S期诱导因子的分子生物学研究

基本信息

批准号：
03J08254
负责人：
伊藤潤哉
金额：
$ 1.54万
依托单位：
National Institute for Physiological Sciences (2004)Hiroshima University (2003)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J08254/
关键词：
卵子活性化核移植クローンキナーゼ PKC カルシウムブタ MPF MAP kinase

项目摘要

はじめに,卵子減数分裂の進行におけるメカニズムを明らかにする目的で,ブタ卵子の減数分裂再開時におけるプロジェステロンレセプター(PR)に関して検討を行った.その結果,AタイプPR(PR-A)およびBタイプ(PR-B)は拮抗的な作用を持ち,これら二つのPRの発現によって減数分裂の再開が制御されていること,PRのantagonistで処理するとADAMTS-1の発現が抑制され,減数分裂再開時に生じる卵丘細胞の膨潤が抑制されることを明らかにした.また,初期胚発生過程におけるメカニズムを解明する目的で,ブタ卵子をモデルとして卵子活性化機構について検討を行った.その結果,卵子活性化時に生じる細胞内カルシウムイオンはカルモジュリン依存性リン酸化酵素(CaMKII)を活性化させ,成熟促進因子(p34^<cdc2> kinase)の制御因子であるcyclin Bを減少させることが明らかされた.一方,CaMKIIの活性化はMAP kinaseの不活性化には関与しておらず,プロテインキナーゼCの活性化により誘起されることも明らかにされた.さらに,この活性化時におけるMAP kinaseの不活性化時期は,減数分裂の完了に伴う第二極体の放出と密接な関係を持つことも明らかにした.さらにこれらの知見を元にして,現在最も作製が難しいと考えられている体細胞核移植を用いたクローンラットについて検討を行った.その結果,体細胞核移植に伴って卵子内に誘起される現象である早期染色体凝集(PCC)が,ラットではほとんど誘起されないこと,またその原因としてラット卵子内のp34^<cdc2> kinase活性がマウスに比べて潜在的に少ないことが明らかとなった.さらに薬剤処理によりp34^<cdc2> kinaseの活性化を人為的に促すことにより,PCC誘起率を改善できることも明らかにした.

For the purpose of egg meiosis reopening, egg meiosis reopening (PR) is discussed. As a result, PR(PR-A) and B (PR-B) maintain antagonistic effects, inhibiting the development of PR and inhibiting the reopening of meiosis. PR antagonist treatment inhibits the development of ADAMTS-1 and inhibits the swelling of cumulus cells during meiosis. To clarify the process of early embryo development, egg activation mechanism is discussed. As a result, during egg activation, the intracellular cytokinases were activated, and cyclin B, a regulatory factor for maturation promoter (p34^<cdc2>kinase), was reduced. On the one hand, the activation of CaMKII is related to the inactivation of MAP kinase. In addition, the activation period of MAP kinase is the period of inactivation, and the meiosis is completed, accompanied by the release of the second polar body. Today, we know that it is difficult to control somatic cell nuclear transplantation. As a result, somatic cell nuclear transfer is accompanied by the phenomenon of early chromosome aggregation (PCC) induced in the ovum, and the causes of this phenomenon are discussed<cdc2>. The activation of p34^<cdc2>kinase was artificially promoted in the treatment of PCCs, and the induction rate of PCC was improved.