ブタ成熟卵子の初期胚発生過程におけるS期誘導因子に関する分子生物学的研究

猪成熟卵母细胞早期胚胎发育S期诱导因子的分子生物学研究

• 批准号: 03J08254
• 负责人: 伊藤 潤哉
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: National Institute for Physiological Sciences (2004)Hiroshima University (2003)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J08254/
• 关键词: 卵子; 活性化; 核移植; クローン; キナーゼ; PKC; カルシウム; ブタ; MPF; MAP kinase

はじめに,卵子減数分裂の進行におけるメカニズムを明らかにする目的で,ブタ卵子の減数分裂再開時におけるプロジェステロンレセプター(PR)に関して検討を行った.その結果,AタイプPR(PR-A)およびBタイプ(PR-B)は拮抗的な作用を持ち,これら二つのPRの発現によって減数分裂の再開が制御されていること,PRのantagonistで処理するとADAMTS-1の発現が抑制され,減数分裂再開時に生じる卵丘細胞の膨潤が抑制されることを明らかにした.また,初期胚発生過程におけるメカニズムを解明する目的で,ブタ卵子をモデルとして卵子活性化機構について検討を行った.その結果,卵子活性化時に生じる細胞内カルシウムイオンはカルモジュリン依存性リン酸化酵素(CaMKII)を活性化させ,成熟促進因子(p34^<cdc2> kinase)の制御因子であるcyclin Bを減少させることが明らかされた.一方,CaMKIIの活性化はMAP kinaseの不活性化には関与しておらず,プロテインキナーゼCの活性化により誘起されることも明らかにされた.さらに,この活性化時におけるMAP kinaseの不活性化時期は,減数分裂の完了に伴う第二極体の放出と密接な関係を持つことも明らかにした.さらにこれらの知見を元にして,現在最も作製が難しいと考えられている体細胞核移植を用いたクローンラットについて検討を行った.その結果,体細胞核移植に伴って卵子内に誘起される現象である早期染色体凝集(PCC)が,ラットではほとんど誘起されないこと,またその原因としてラット卵子内のp34^<cdc2> kinase活性がマウスに比べて潜在的に少ないことが明らかとなった.さらに薬剤処理によりp34^<cdc2> kinaseの活性化を人為的に促すことにより,PCC誘起率を改善できることも明らかにした.

は じ め に, egg meiosis の に お け る メ カ ニ ズ ム を Ming ら か に す で る purpose, ブ タ when to open the egg の meiosis に お け る プ ロ ジ ェ ス テ ロ ン レ セ プ タ ー (PR) に masato し て 検 line for を っ た. そ の as A result, A タ イ プ pagerank (PR - A) お よ び B タ イ プ (PR - B) は antagonism な role を ち to have, こ れ ら two つ の PR の 発 now に よ っ て meiosis の to open が suppression さ れ て い る こ と, PR の antagonist で 処 Richard す る と ADAMTS - 1 の 発 now が inhibit さ れ, meiosis to open when born に じ る eggs high cell の swelling が inhibit さ れ る こ と を Ming ら か に し た. ま た, born in the early embryo 発 process に お け る メ カ ニ ズ で ム を interpret す る purpose, ブ タ eggs を モ デ ル と し て eggs activation agency に つ い て 検 line for を っ た. そ の results, when eggs activation に raw じ る intracellular カ ル シ ウ ム イ オ ン は カ ル モ ジ ュ リ ン dependency リ ン (CaMKII) を acidification enzyme activeness さ せ, mature promoting factor (p34 ^ < cdc2 > kinase) <s:1> control factor であるcyclin Bを reduces させる させる とが Ming ら された された. Side, CaMKII の activeness は MAP kinase の not activeness に は masato and し て お ら ず, プ ロ テ イ ン キ ナ ー ゼ C の activeness に よ り induced さ れ る こ と も Ming ら か に さ れ た. さ ら に, こ の activeness when に お け る MAP Kinase の は activeness period, not finished meiosis の に with the second polar body う の release と contact な masato is を hold つ こ と も Ming ら か に し た. さ ら に こ れ ら の knowledge を yuan に し て, now the most も cropping が difficult し い と exam え ら れ て い る somatic cell nuclear transfer を with い た ク ロ ー ン ラ ッ ト に つ い て 検 line for を っ た. そ の as a result, the somatic cell Nuclear transfer に with っ て egg に induced さ れ る phenomenon で あ る early chromosome aggregation (PCC) が, ラ ッ ト で は ほ と ん ど induced さ れ な い こ と, ま た そ の reason と し て ラ ッ ト egg の p34 ^ < cdc2 > Kinase activity が マ ウ ス に than べ て less potential に な い こ と が Ming ら か と な っ た. さ ら に 薬 tonic 処 Richard に よ り p34 ^ < cdc2 > kinase の activeness を man-made に promote す こ と に よ り, PCC induced rate を improve で き る こ と も Ming ら か に し た.

项目成果

Masayuki Shimada: "PI 3-kinase in cumulus cells is responsible for both suppression of spontaneous maturation and induction of gonadotropin-stimulated maturation of porcine oocytes"Journal of Endocrinology. 179. 25-34 (2003)

Masayuki Shimada：“卵丘细胞中的 PI 3-激酶负责抑制猪卵母细胞的自发成熟和诱导促性腺激素刺激的成熟”内分泌学杂志。

Viable rat offspring derived from oocytes intracytoplasmically injected with freeze-dried sperm heads

• DOI: 10.1017/s096719940500300x
• 发表时间: 2005-02-01
• 期刊: ZYGOTE
• 影响因子: 1.7
• 作者: Hirabayashi, M;Kato, M;Hochi, S
• 通讯作者: Hochi, S

Junya Ito: "Effect of Protein Kinase C Activator on Mitogen-Activated Protein Kinase and p34^<cdc2> Kinase Activity During Parthenogenetic Activation of Porcine Oocytes by Calcium Ionophore"Biology of Reproduction. 69. 1675-1682 (2003)

Junya Ito：“钙离子载体对猪卵母细胞孤雌生殖激活过程中蛋白激酶 C 激活剂对丝裂原激活蛋白激酶和 p34^<cdc2> 激酶活性的影响”生殖生物学。

The role of Calcium/Calmodulin-dependent protein kinase II(CaMKII) on inactivation of MAP kinase and p34^<cdc2> kinase during fertilization and activation in pig oocytes

钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶 II (CaMKII) 对猪卵母细胞受精和激活过程中 MAP 激酶和 p34^<cdc2> 激酶失活的作用

• 发表时间: 2004
• 期刊: Reproduction 128
• 作者: M.Hirabayashi;J.Ito
• 通讯作者: J.Ito