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心筋収縮タンパク・ミオシンの構造改変とその心筋細胞内発現による心機能改善に関する研究

心肌收缩蛋白肌球蛋白结构修饰及其在心肌细胞内表达改善心功能的研究

基本信息

批准号：
03F03908
负责人：
杉浦清了
金额：
$ 0.77万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03908/
关键词：
単一心筋細胞微小管心筋症ハムスターミオシン軽鎖

项目摘要

GFP遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターを用いGFPを発現したラット心筋細胞の機能をコントロールベクターを感染させた細胞およびウイルスを感染させない細胞と比較する実験を続けたところGFP発現細胞において等尺性張力のみが軽度であるが有意に低下することを確認した。このメカニズムを解明するためクロスブリッジレベルでの影響(in vitro motility assay)とskinned fiber標本(Ca感受性)を検討中である。一方心筋症ハムスター(TO-2株)から単離した細胞の機能低下の原因を明らかにするために収縮タンパクの解析、細胞内カルシウム濃度の測定などを行い細胞内カルシウム調節の異常が収縮力低下、拡張機能不全などの機能異常をある程度説明し得ることが分かった。また心筋症ハムスターの心筋細胞では細胞骨格の一部である微小管の密度が増加していることを確認したがこの意義を明らかにするため新しく単一細胞の引っ張り、圧縮、剪断剛性を測定する実験系を開発し検討したところ微小管の密度は剪断剛性のみに寄与しておりコルヒチン投与により微小管を脱重合させると正常化することなどを見出した。これらと平行して心筋ミオシン軽鎖に結合するペプチド(ミオシン軽鎖リン酸化酵素のミオシン結合部のみからなる)が機能に与える影響をin vitro motility assayを用いて検討しており正の変力作用を持つという結果を得つつある。

GFP gene expression is determined by the expression of GFP gene and the function of GFP gene expression. GFP gene expression is determined by the expression of GFP gene and the function of GFP gene expression is determined by the expression of GFP gene. GFP gene expression is determined by the expression of GFP gene. The influence of the enzyme on the activity of calcium (Ca) is discussed in this paper. The causes of cellular dysfunction in patients with cardiac muscle disease (TO-2 strain) were analyzed, and intracellular concentrations were measured. The degree of cellular dysfunction due to abnormal intracellular regulation of contractile force and contractile dysfunction was explained. The density of microtubules in one part of the skeletal structure of the heart muscle cells increases and the significance of this phenomenon is confirmed. Shearing stiffness measurement system development and normalization of microtube density This is the first time that the enzyme has been used in vitro motility assay.