心筋ミオシン分子の構造改変による最適な強心効果の導入に関する研究

心肌肌球蛋白分子结构修饰引入最佳正性肌力作用的研究

• 批准号: 08670767
• 负责人: 杉浦 清了
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08670767/
• 关键词: 心筋ミオシン; 収縮性; インビトロ運動再構成系

心筋ミオシン分子に構造改変を導入することにより力発生能力を増大させるための基礎的情報を得るため、2種類のモデルにおいてミオシンの分子構造とモーター機能との関係を考察した。1)哺乳類心筋ミオシンの2つのアイソフォームV1とV3はATPase部位、アクチン結合部位、軽鎖結合部位などの機能部位を含む7カ所で構造が異なっている。この2つのミオシンをモデルとしてインビトロ運動再構成実験によって力発生能力を比較し構造と機能との関係を考察した。幼若ラット(V1)および甲状腺機能低下ラット(V3)心筋から抽出したミオシンをカバーグラスに固定しその上に蛍光ラベルしたアクチンフィラメントをATPを含む溶液に浮遊させて導入するとアクチンフィラメントは滑り運動を行った。さらにフィラメントの尾端にマイクロスフィアを付着させこれを顕微鏡の対物レンズを通して導入したレーザービームによりトラップした。フィラメントはマイクロスフィアを引っ張りトラップの中心から変位したのでこの位置から力を推定した。2つのミオシンは無負荷滑り速度では大きく異なるものの平均力発生能力ではほとんど差がないことが分かった。2)細胞性粘菌ミオシン発現系を用いヒト家族性肥大型心筋症に見られる変異ミオシンを作成し機能を測定した。この結果ミオシン頭部の内反応性の高いSH基に近い部位の変異、および軽鎖結合部位にある変異で力発生能力が低下することが明らかになった。特に後者ではATPase活性は保たれておりエネルギー変換において重要な部位であることを示唆する。これらの結果に基づきさらに積極的な分子構造改変を行う予定である。

Basic information on the increase in force generation capabilities by introducing structural changes to the molecules of the muscle muscle cells was obtained, and the relationship between the molecular structure and function of the two types of muscle cells was examined. 1)In mammals, the structure of the two parts of the tendon is different from that of the ATPase site, the receptor binding site, the receptor binding site, and the functional site. The relationship between structure and function is investigated. If the thyroid gland (V1) and hypothyroidism (V3) are fixed, the ATP will be introduced into the solution containing the thyroid gland. The end of the game is the end of the game. The position of the target is estimated. 2. The average force generation capacity of the vehicle is different from that of the vehicle without load. 2)The development of cellular myxomycetes is a function of familial hypertrophy. As a result, the internal reflection of the head is different from that of the central part, and the force generation ability of the locking part is low. In particular, the ATPase activity is maintained at the most important sites. The result is that the molecular structure of the protein is changed.

项目成果

Sata,M.: "Coupling between myosin ATPase cycle and creatine kinase cycle facilitate cardiac actomyosin sliding in vitro.A clue to mechanical dysfunction during myocardial ischemia" Circulation. 93. 310-317 (1996)

Sata，M.：“肌球蛋白 ATP 酶循环和肌酸激酶循环之间的耦合促进心脏肌动球蛋白在体外滑动。心肌缺血期间机械功能障碍的线索”循环。