心筋収縮タンパク・ミオシンの構造改変とその心筋細胞内発現による心機能改善に関する研究

心肌收缩蛋白肌球蛋白结构修饰及其在心肌细胞内表达改善心功能的研究

• 批准号: 03F00908
• 负责人: 杉浦 清了
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F00908/
• 关键词: 心筋細胞; ミオシン軽鎖; 張力測定

変異心筋ミオシン軽鎖1を単離心筋細胞に発現させ、その機能に与える影響を検討することを目的としているが本年度は1)機能測定のために開発した単一心筋細胞張力測定装置をさらに改良し外部仕事を評価できるようにした。また基礎実験として1)単離した成熟ラット心筋細胞をタンパクが発現し置換するまでの間形質転換を来さずに培養するため細胞をペーシング刺激しながら培養を行うことを行い、ペーシングの条件などを検討した。この結果2日目までは十分な収縮力を保ったまま培養することができた。ただしタンパクの置換までにはさらに数日の培養が必要と考えている。2)遺伝子導入に関するデータを得るためにGFP遺伝子を組み込んだアデノウイルスベクターを用いGFPを発現した心筋細胞の機能をコントロールベクターを感染させた細胞およびウイルスを感染させない細胞と比較した。2日目には90%以上の感染細胞にGFPが発現していることを蛍光顕微鏡にて確認した。2日目における比較では細胞の短縮距離および速度には3群間に差は認められなかった。また細胞の発生張力はGFP発現細胞で低下している傾向が見られたがこれも有意ではなかった。これらの結果を論文に投稿中である。これとは別に心筋症ハムスターより単離した心筋細胞の機能を検討したがここでは健常対象群と比べ有意な短縮速度、発生張力、外部仕事の低下が認められた。特に外部仕事の低下は顕著であり張力を測定することの意義を示すものであった。

In order to improve the performance of the equipment, the equipment for the determination of the strength of the cell, the equipment for the determination of the strength of the cell, the equipment for determining the strength of the cell, the machine, the machine. (1) do not know how to grow up. (1) do not know if you are in a state of maturity. do not know if you are in the shape of a cell, so that you can learn more about it. The results show that on the 2nd, we will try our best to make sure that we do not know what to do. I don't know if it's necessary to do so for a few days. 2) use the GFP to detect the ability of the cell to detect the infection of the infected cells. The cells of the infected cells have been infected. In the 2nd day, more than 90% of the infected cells were infected by GFP. On the 2nd, please compare the short distance between the cells and the speed of the three groups. The GFP shows that the cell is low. It is intended to cause a loss of strength. The results show that there are some mistakes in the contribution. Don't worry about heart disease, don't worry about it, don't worry about it. The purpose of this paper is to show the meaning of the measurement and determination of the strength of the external staff.

项目成果

Yasuda S, Sugiura S, Yamashita H, Nishimura S, Saeki Y, Momomura S, Katoh K, Nagai R, Sugi H.: "Unloaded shortening increases the peak of Ca^<2+> transients but accelerates their decay in rat single cardiac myocytes"Am J Physiol. 285. H470-H475 (2003)

Yasuda S、Sugiura S、Yamashita H、Nishimura S、Saeki Y、Momomura S、Katoh K、Nagai R、Sugi H.：“卸载的起酥油增加了 Ca^<2> 瞬变的峰值，但加速了大鼠单心肌细胞的衰减

Yamashita H, Sugiura S.Fujita H, Yasuda S, Nagai R, Saeki Y, Sunagawa K, Sugi H.: "Myosin light chain isoforms modify force-generating ability of cardiac myosin by changing the kinetics of actin-myosin interaction"Cardiovasc Res. (in press). (2004)

Yamashita H、Sugiura S.Fujita H、Yasuda S、Nagai R、Saeki Y、Sunakawa K、Sugi H.：“肌球蛋白轻链异构体通过改变肌动蛋白-肌球蛋白相互作用的动力学来改变心肌肌球蛋白的力生成能力”Cardiovasc Res