Lokalisierung Replikations- und Transkriptionsaktiver "Factories" in vivo

体内复制和转录活性“工厂”的定位

• 批准号: 5339220
• 负责人: Professor Dr. Harald Saumweber
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Zytogenetik
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5339220?language=en
• 关键词: Lokalisierung; Replikations; und; Transkriptionsaktiver; Factories

DNA Replikation, Transkription und RNA Processing finden im Zellkern in speziellen Domänen oder "Foci" statt, die von einigen Autoren auch als "Factories" bezeichnet werden. Es wurde mehrfach vermutet, daß solche Replikationsfabriken in einer funktionellen Beziehung zu den "Foci" der Transkription stehen könnten. Im vorgeschlagenen Projekt möchte ich mit Blick auf diese Fragestellung die Beziehung zwischen den Orten der Replikation und der Transkription in Zellkernen unterschiedlichen Polytäniegrades bei Drosophila melanogaster untersuchen. Dazu wurden in meiner Abteilung und in Zusammenarbeit mit der Arbeitsgruppe von Frau Dr. C. Cardoso (MDC Berlin) verschiedene transgene Stämme hergestellt. GFP-PCNA wird als Marker für Replikations-aktive Stellen verwendet. Die Expression der Transgene ist Ga14 induzierbar. Nach Gewebe-spezifischer Expression in Speicheldrüsen unterschiedlicher larvaler Stadien wird die 3D Verteilung der markierten Proteine mit hochauflösender Digital Imaging Mikroskopie in vivo untersucht. Dabei sollen nach Möglichkeit auch die räumlichen Beziehungen chromosomal nicht direkt benachbarter Regionen ausgewertet werden. Koexpression beider Proteine mit unterschiedlicher Markierung soll den direkten Vergleich der 3D Anordnung Replikations- und Transkriptions-aktiver Stellen ermöglichen.

DNA 复制、转录和 RNA 处理在 Zellkern 的 speziellen Domänen 或“Foci”statt、die von einigen Autoren 和“Factories”中找到。这是一个非常简单的方法，它可以在转录过程中的“焦点”中实现复制。我的项目是在果蝇下的 Zellkernen 中进行复制和转录的过程。 Dazu wurden in meiner Abteilung und in Zusammenarbeit mit der Arbeitsgruppe von Frau Dr. C. Cardoso (MDC Berlin) verschiedene transgene Stämme hergestellt。 GFP-PCNA 是复制活动标记的 Stellen verwendet。转基因的表达是 Ga14 induzierbar。 Nach Gewebe-spezifischer 在特殊幼虫幼虫中的表达 3D Verteilung der markierten Proteine mit hochauflösender Digital Imaging Mikroskopie in vivo undersucht。 Dabei sollen nach Möglichkeit auch die räumlichen Beziehungen 染色体 nicht direkt benachbarter Regionen ausgewertet werden。蛋白质的表达是基于 3D 复制和转录激活的直接标记。