植物多価ワクチンにより誘導される防御応答遺伝子の発現解析とDNAアレイ作出

植物多价疫苗诱导的保护性反应基因的表达分析和DNA阵列构建

• 批准号: 04F04537
• 负责人: 石井 英夫
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: National Institute for Agro-Environmental Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04537/
• 关键词: 全身獲得抵抗性; 植物免疫; 抵抗性誘導; プラントアクティベーター; アシベンゾラルSメチル; フェニルプロパノイド系; リグニン; 遺伝子発現解析

「植物多価ワクチン」アシベンゾラルSメチル(ASM)による全身抵抗性の誘導・発現過程で、キュウリ細胞壁におけるリグニンの蓄積が炭疽病菌の侵入に対する物理的障壁として働くことが明らかになっている。そこで、フェニルプロパノイド系酵素などリグニン生成に関連する酵素であるlignin peroxidase(LPO)、caffeoyl-CoA O-methyltransferase(CCOAMT)、cinnamyl alcohol dehydrogenase(CAD)、さらにはNADPH oxidaseやcalcium-dependent proteinkinase(CDPK)、たんぱく質りん酸化酵素(MAPK)等の遺伝子をキュウリからクローニングし、塩基配列を決定した。また、これに基づいて特異的プライマーを作製し、リアルタイムPCRによる遺伝子発現解析を行った。全身抵抗性を誘導したキュウリ葉では、ASM処理6〜12時間後にLPOやMAPK、CDPK、NADPH oxidaseの遺伝子発現が有意に増大し、細胞壁における過酸化水素やリグニンの蓄積に関するこれまでの実験結果ともよく一致した。一方、フェニルアラニンアンモニアリアーゼの下流に位置するCCOAMT、CADの遺伝子発現には、有意な違いがみられなかった。このほか、転写因子やたんぱく質分泌等に関連する遺伝子に関して発現解析を行った。次に薬用植物等の抽出物を蒸留水で希釈し、鉢植えキュウリ苗に散布、風乾後、炭疽病菌またはうどんこ病菌を接種して発病抑制効果を調べた。供試した植物抽出物80種のうち、炭疽病に対してはユッカ葉、カムカム種子、ガンハクサイ根茎の100倍希釈液が、対照の蒸留水散布に比べて80%以上、グアバ葉、チャの実の100倍液が70%以上の安定した発病抑制率を示した。また、うどんこ病に対してはタマリンド種皮と藤茶葉の100倍液が80%以上の発病抑制率を示した。供試サンプルの中には、培地上で菌の生育を強く阻害するものも見られたため、現在有効成分の同定や作用機構の解明を進めている。

The systemic resistance test (ASM) leads to the realization of the process, the accumulation of anthracnose pathogen in the cell wall, the invasion of anthracnose pathogen, the invasion of the physical barrier of anthracnose, the pathogen of anthracnose. The production of enzymes, such as lignin peroxidase (LPO), caffeoyl-CoA O-methyltransferase (CCOAMT), cinnamyl alcohol dehydrogenase (CAD), NADPH oxidase (CDPK), acidified enzyme (MAPK) and so on. In this case, you will be able to analyze the row data in the first place, and then you will be able to analyze the data in the PCR file. After 6: 12 hours of ASM treatment, LPO MAPK, CDPK, NADPH oxidase spores were detected with systemic resistance, and the cell walls were overacidified. The results were consistent. On the other hand, the location of the CCOAMT, the CAD, the location, the location, the location, This is the result of the analysis of the secretion of factors, such as the secretion of factors. After drying, anthracnose pathogens were inoculated with anthracnose pathogens and inoculated with pathogens to restrain fruit spores. 80 kinds of plant extract, anthracnose, anthracnose, rhizome, rhizome and rhizome were tested, the ratio of steaming and retention water dispersion was more than 80%, and the inhibition rate of diazepam disease was more than 70%. The disease inhibition rate showed that the disease inhibition rate was more than 80% in 100-fold solution of rattan tea. The purpose of this paper is to test that the growth of bacteria on the ground can strongly prevent the growth of bacteria, and there is now a mechanism for the same determination of components.