イネ未熟種子におけるデンプン蓄積過程でOSKプロテインキナーゼが果す役割の解明

阐明 OSK 蛋白激酶在未成熟水稻种子淀粉积累过程中的作用

• 批准号: 04F04545
• 负责人: 高野 誠
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: National Institute of Agrobiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04F04545/
• 关键词: イネ; プロテインキナーゼ; サブユニット; デンプン蓄積

私たちの研究室では、イネからSNF1オーソログを3種類(OSK1,OSK24,OSK35)単離し、それらの機能解析を進めている。Dr.Sreekalaは、以前の研究室で誘導性の発現ベクターを開発していた(Sreekala et al.,2005)ので、それを利用してOSK遺伝子のアンチセンス配列やRNAiを任意の時期に発現誘導できるベクターを構築した。この誘導性のベクターシステムは、ステロイドホルモン(s-estradiol)誘導性のプロモーター(XVE)によってcre-loxPによる部位特異的な組み換えを引き起こし、その結果、アンチセンスやRNAiが転写される仕組みになっている。このベクターを用いて形質転換体を作成すると、開花までは正常に生育した。その後、ステロイドホルモンを噴霧してRNAiを誘導したところ、予想通り種子の発達が阻害された。現在OSK遺伝子の発現や、OSKの標的と考えられる酵素の活性を解析中である。イネのOSKプロテインキナーゼはαβγの3量体をとるが、それぞれのサブユニットに複数の分子種が存在する(3種類のα、4種類のβ、2種類のγサブユニット)ことが明らかになった。これらは単純に重複しているわけではなく、その組み合わせが機能分化と関わっている可能性が十分考えられる。そこでイネ未熟種子からOSK活性を指標にOSK複合体を粗抽出し、ゲル濾過クロマトグラフィーで分離して活性画分の分子量を推定すると、230kDと150kDに相当する画分に溶出された。現在これらの画分に含まれるタンパク質を同定中である。形成するサブユニット構成の違いでOSKの活性や細胞内局在性、基質特異性などが調節されている可能性が高く、これらのサブユニット構成とデンプン蓄積制御機構との関係が明らかになれば、イネにおけるデンプン蓄積機構の解明に大きく寄与すると期待される。

In private, the laboratory will be able to analyze and analyze the progress of the laboratory, the SNF1 and the OSK1,OSK24,OSK35. Dr.Sreekala, the previous research lab will make sure that you can start the Sreekala et al.,2005 program, and the RNAi will be assigned in any time period by using the sub-system of the RNAi system. In this case, you need to know that you need to know that you have a problem, and that you have a problem. You know, you know, the results, the results, The baby was born normally in the form of a tortoise, which was made into a baby and blossomed. After that, you can tell the RNAi to make sure that you don't know how to stop the damage. At present, the analysis of the activity of enzymes is in the process of analyzing the activity of enzymes in the presence of OSK and OSK. Because of the high molecular weight of alpha beta gamma and complex numbers, the molecular weight of alpha-beta, alpha-gamma and gamma-ray in the presence of complex molecules (3-type alpha, 4-type beta, 2-type γ-ray) is very important. There is a great deal of research on the possibility that there is a significant difference in the possibility of differentiation between the two groups. "OSK activity" means the crude extraction of the OSK complex, the molecular weight of the active fraction, the molecular weight of the 230kD complex, the molecular weight of the active fraction, the molecular weight of the complex, the molecular weight of the complex, the molecular weight of the extract, the molecular At present, the picture is divided into two parts: they are in the same position. As a result of the formation of the system, the OSK activity is high in the cell, the possibility is high, the system is active, the system is responsible, and the storage mechanism is expected to be sent to the organization.