シナプス後肥厚に局在するタンパク質のプロテオミクス

突触后增厚中蛋白质的蛋白质组学

• 批准号: 04J00878
• 负责人: 村田 康信
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J00878/
• 关键词: プロテオミクス; シナプス後肥厚; Postsynaptic Density (PSD); PRR7; Mass Spectrometry; Postsynaptic Density(PSD)

興奮性シナプスのシナプス後膜上および膜直下には、NMDA型およびAMPA型グルタミン酸受容体、イオンチャネル、PSD-95等の足場タンパク質に加えて、細胞骨格系やシグナル伝達系のタンパク質までもが高密度に集積して、Postsynaptic Density(シナプス後膜肥厚、PSD)と呼ばれる一種のタンパク質複合体を形成している。昨年度までに、ラット前脳から精製したPSD画分のプロテオーム解析を行い、新規タンパク質PRR7の機能解析結果を既に報告した。PRR7について更に、Q-Tof型のMass Spectrometryを使用して翻訳後修飾の解析を行い、セリン68がリン酸化されることを同定した。セリン68は、Erk1(MAPキナーゼ)、cdk5等の基質になることがアミノ酸配列から予測される。これらのシグナル伝達分子がPSDに局在することは、これまでのプロテオーム解析によって明らかとなっており、PRR7が後シナプスの多彩なシグナル伝達物質によってリン酸化されることが推測される。また、ポストシナプスのタンパク質複合体の構成成分をより明確にするために、質量分析法から得られたデータの定量化を行った。タンパク質同定に使用したペプチドの情報を使用して、PSD画分での存在量、PSD画分への濃縮の度合いについて定量化を行い、プロテオーム解析によって同定されたタンパク質のなかから、PSD画分に特異的に濃縮するタンパク質のリストアップを行った。

Excitatory シ ナ プ ス の シ ナ プ ス membrane after お よ び membrane by に は, NMDA receptor お よ び AMPA type グ ル タ ミ ン acid by capacity, イ オ ン チ ャ ネ ル, PSD - 95 の foot field タ ン パ ク quality に plus え て, cell skeleton や シ グ ナ ル 伝 da is の タ ン パ ク qualitative ま で も が high-density に set product し て and Postsynaptic Density(シナプス posterior membrane hypertrophy, PSD)と hu ばれる a <s:1> タ パ パ パ the を mass complex を forms て て る る る る る Before yesterday annual ま で に, ラ ッ ト 脳 か ら refined し た PSD drawing points の プ ロ テ オ ー ム parsing を い, new rules タ ン パ ク qualitative PRR7 の function analytical results を に both reports し た. PRR7 に つ い て に, Q - Tof の Mass Spectrometry を use し て modification after turn 訳 の parsing を い, セ リ ン 68 が リ ン acidification さ れ る こ と を with fixed し た. Youdaoplaceholder0 <s:1> 68 される, Erk1(MAPキナ ゼ ゼ ゼ), cdk5, etc. <s:1> matrix になる ノ とがア ノ ノ ノ acid composition ノ ら for testing される. こ れ ら の シ グ ナ ル 伝 が PSD に bureau of molecules in す る こ と は, こ れ ま で の プ ロ テ オ ー ム parsing に よ っ て Ming ら か と な っ て お り, PRR7 が after シ ナ プ ス の colorful な シ グ ナ ル 伝 of material に よ っ て リ ン acidification さ れ る こ と が speculation さ れ る. ま た, ポ ス ト シ ナ プ ス の タ ン パ ク quality, and the composition of complex の を よ り clear に す る た め に, quality analysis か ら have ら れ た デ ー タ の quantitative を line っ た. タ ン パ ク mass with fixed に use し た ペ プ チ ド の intelligence を use し て, PSD picture で の, the presence of PSD drawing points へ の enrichment の degrees or い に つ い て quantitative を い, プ ロ テ オ ー ム parsing に よ っ て with fixed さ れ た タ ン パ ク qualitative の な か か ら, PSD picture に specific に enrichment す る タ ン パ ク qualitative の リ ス ト ア ッ プ を line っ た.