シャペロニンダイナミクスの1分子イメージング

伴侣蛋白动力学的单分子成像

• 批准号: 04J01608
• 负责人: 座古 保
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J01608/
• 关键词: 分子シャペロン; シャペロニン; プレフォルディン; 1分子イメージング; SPRセンサー

プレフォルディンは、変性中間状態にあるタンパク質を捕捉(アレスト)して、グループII型シャペロニンに受け渡す機能を有する新しい分子シャペロンである。6つのサブユニット(α_2β_4)がそれぞれコイルドコイルを形成し、くらげのような構造をしている。それぞれの足(サブユニット)の先端で変性中間状態の蛋白質を結合し、グループII型シャペロニンに受け渡すと考えられているが、変性タンパク質やシャペロニンをどのように認識しているかは明らかになっていない。私は超好熱性古細菌由来グループII型シャペロニン、プレフォルディンを用いて、それらの協調機構の解明を行った。本研究では、1分子蛍光イメージング、SPRセンサーを用いることにより、シャペロニン、プレフォルディンの相互作用メカニズムの解明の糸口を得ることに成功した。超好熱性古細菌Pyrococcus horikoshii OT3由来プレフォルディンは豚心臓由来クエン酸合成酵素(CS)の熱変凝集を阻害し、酸変性したGFPの自発的凝集を阻害する。一方、実際にプレフォルディンとシャペロニンが物理的に相互作用していることは、1分子イメージングや、SPRセンサーによる解析の結果証明された。また、X線結晶構造からN-及びC-末端部分が、変性タンパク質認識やシャペロニンとの結合に重要な部位であることを示唆されているので、α、βサブユニットの末端欠損体から、変性タンパク質結合部位及びシャペロニンへの結合部位の特定を試みた。その結果、βサブユニットのC末6-8残基が変性タンパク質認識に重要な部位であり、PhPFDαC末8残基、βC末5残基に、シャペロニンとの結合に重要な部位が存在することが示唆された。

There is a lot of trouble, a lot of information, and a lot of information. 6. Please tell me that the formation of the disease was caused by the formation of the virus (α _ 2 β _ 4). In the end of the study, there is a combination of protein and protein in the end of the disease. Type II, type II, protein, protein and protein. The origin of private antiseptic bacteria is very good. Type II antiseptic drugs are used to treat people, and the coordination mechanism is responsible for the interpretation of the drugs. In this study, one molecule of light, one molecule of light, one The origin of the super-good archaic bacteria Pyrococcus horikoshii OT3 is the acid synthesis enzyme (CS), the agglutination of acid synthesis enzyme (CS), and the agglutination of acid, acid and GFP. On the other hand, the results of the analysis of the interactions of physics, 1 molecule, 1 molecule and SPR molecules show that there are significant differences in the results of the analysis of the physics. The results of X-ray and X-ray analysis show that the parts of N-and C-terminal, the important parts of the system, the end of the body, the part of the body, the part of the end, the end of the body, the end The results showed that there were significant differences in the important sites of β-terminal 6-8 residues, PhPFDα C8 residues, β-C terminal 5 residues, β-terminal 6-8 residues, β-terminal 5 residues, β-terminal 6-8 and β-terminal 5 residues.

项目成果

Reaction mechanism of archaeal molecular chaperones

古菌分子伴侣的反应机制

• 发表时间: 2004
• 期刊: Tanpakushitsu Kakusan Koso 49
• 作者: A.Arakaki;S.Hideshima;T.Nakagawa;D.Niwa;T.Tanaka;T.Matsunaga;T.Osaka;Zako T.;Okochi M.;Yoshida T.
• 通讯作者: Yoshida T.

Kinetic analysis of interactions between archaeal prefoldin and chaperonin.

古菌前折叠蛋白和伴侣蛋白之间相互作用的动力学分析。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Recent Res.Develop.Biophys 3
• 作者: Zako T.;T.Funatsu;M.Yohda.
• 通讯作者: M.Yohda.