アミロイド凝集を指標とした生体化合物の内分泌撹乱性評価法の創出

体内に取り込まれる化合物分子に関して、長期的に健康に影響する要因として内分泌撹乱性の評価が重要である。通常は甲状腺ホルモンの輸送タンパク質であるトランスサイレチン(TTR)との結合能を評価するが、従来法では標準物質の分離が必要、感度が不足しているなどの問題点があった。そこで本研究では凝集性タンパク質であるアミロイドβ(Aβ)の凝集を指標とした、簡便かつ高感度な内分泌撹乱性の分析評価法を開発することを目的とした。まず、TTRと目的化合物、Aβを共存させ、インキュベートした後のAβ凝集量を蛍光プローブで定量することで目的化合物のTTR結合能および内分泌攪乱性を評価することを目指した。まず、TTRによるAβ凝集への影響を、アミロイド特異的な蛍光プローブの１種であるチオフラビンT（ThT）により調べたところ、TTR濃度依存的にAβ凝集が減少したことが分かった。この結果はTTRがAβ凝集を阻害することを示している。さらに、TTR存在下との結合が強いことが知られているT4を用いて本アイデアの有効性を確立することを目指した。様々な濃度のT4をTTRとインキュベートし、Aβ凝集阻害効果への影響を調べた。その結果、T4濃度依存的にAβ凝集量が増加していた。これはT4がTTRに結合したために、Aβ凝集阻害効果が減少したためと考えられる。TTRへの結合は、T4が内分泌撹乱性を有することを示すため、Aβ凝集量を調べることで、化合物の内分泌撹乱性が評価できることが明らかとなった。

体内に取り込まれる化合物分子に関して、長期的に健康に影響する要因として内分泌撹乱性の評価が重要である。通常は甲状腺ホルモンの輸送タンパク質であるトランスサイレチン(TTR)との結合能を評価するが、従来法では標準物質の分離が必要、感度が不足しているなどの問題点があった。そこで本研究では凝集性タンパク質であるアミロイドβ(Aβ)の凝集を指標とした、簡便かつ高感度な内分泌撹乱性の分析評価法を開発することを目的とした。まず、TTRと目的化合物、Aβを共存させ、インキュベートした後のAβ凝集量を蛍光プローブで定量することで目的化合物のTTR結合能および内分泌攪乱性を評価することを目指した。まず、TTRによるAβ凝集への影響を、アミロイド特異的な蛍光プローブの１種であるチオフラビンT（ThT）により調べたところ、TTR濃度依存的にAβ凝集が減少したことが分かった。この結果はTTRがAβ凝集を阻害することを示している。さらに、TTR存在下との結合が強いことが知られているT4を用いて本アイデアの有効性を確立することを目指した。様々な濃度のT4をTTRとインキュベートし、Aβ凝集阻害効果への影響を調べた。その結果、T4濃度依存的にAβ凝集量が増加していた。これはT4がTTRに結合したために、Aβ凝集阻害効果が減少したためと考えられる。TTRへの結合は、T4が内分泌撹乱性を有することを示すため、Aβ凝集量を調べることで、化合物の内分泌撹乱性が評価できることが明らかとなった。