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植物病原菌の遊走子運動機構〜マスチゴネマの構造と機能〜

植物病原菌的游动孢子运动机制～鞭毛虫的结构与功能～

基本信息

批准号：
04J02483
负责人：
有川幹彦
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Nara Women's University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、Phytophthora(エキビョウキン属)とその近縁種及び原生動物において、遊走子の鞭毛機能、特に細胞の推進力発生におけるマスチゴネマの働きを分子レベルで明らかにすることを目的とした。これまでに、その基礎研究において作製したPhytophthora遊走子のマスチゴネマに対するモノクローナル抗体を用いて、蛍光抗体法および免疫電子顕微鏡法により、その抗原タンパク質の遊走子細胞における局在性を明らかにした。今回、この特異性の高い抗体を用いて、免疫沈降法による抗原タンパク質、すなわち、マスチゴネマ構成タンパク質の高純度精製を試みた。遊走子からではなく菌糸から粗抽出を行うことにより、目的タンパク質のロスを最小限に抑えた。また、粗抽出液をsepharose beadsでpre-washすることにより、非特異的に吸着するタンパク質の最終試料への混入を防いだ。更に、精製過程の遠心操作を極力軽く行うことにより、機械的作用による結合タンパク質の解離を防いだ。最終試料を電気泳動法によって分離し、精製度の高いマスチゴネマ構成タンパク質を得た。現在、切り出した目的タンパク質の部分アミノ酸配列を解析中である。

In this study, Phytophthora was used to detect the recent species and native animals, the flagellum machine, the flagellum machine, and the special cell propulsion force. In the study of antigens and antigens, Phytophthora antibodies were detected by radioimmunoassay, light antibody method, immunophotography, microarray, antigens, antigens, microscopes, antigens, antigens, antibodies, antibodies, This time, specific antibodies were used, immuno-sedimentation method was used to detect antigens, and antigens were tested. The purpose of this study is to determine the minimum limit of bacteria. The crude extract liquid sepharose beads, the pre-wash extract, the non-specific suction liquid, the suction material, the most effective material, and the anti-jamming agent. Pay attention to the process, the heart of the operation, the strength of the operation, the function of the machine and the combination of the equipment and the equipment. The best method of swimming is to separate and improve the precision of swimming. At present, the purpose of this article is to find out that the acid configuration is in the process of analysis.