ペルオキシソーム形成の分子基盤の解明

阐明过氧化物酶体形成的分子基础

• 批准号: 04J06778
• 负责人: 宮田 暖
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J06778/
• 关键词: VDAC2; Pex7p; Pex5p; 線虫; 神経; ペルオキシソーム

本研究では、細胞小器官ペルオキシソーム形成機構を分子レベルで解明することを目的としている。本年度は、1)VDAC2欠損変異CHO細胞ZP114の解析及び2)ペルオキシソームターゲティングシグナル(PTS)受容体Pex5pおよびPex7pの細胞内動態をin vitro輸送系を用いた解析を行った。1)前年度までに、VDAC2欠損細胞であるZP114にBcl-xLを過剰発現させることで、VDAC2欠損によって亢進されているアポトーシス応答が抑制され、同時にペルオキシソーム形成能が回復する事を見い出した。今年度は、この結果を受けて、アポトーシス促進因子であるBakがZP114においてペルオキシソーム形成に対して何らかの影響を与えているのではないかと考え、ZP114に対して、RNA干渉法によってBakの発現を抑制した。結果、予想通りZP114において、ペルオキシソーム形成能の回復が観察された。2)Pex7pのin vitro輸送系を用い、Pex7pの細胞内動態の解析を行った。結果、Pex7pはPex5pと同様、ATP非依存的にペルオキシソームにインポートされていること、Pex7pがPex5pLを介してインポートされること、Pex7pとPex5pがペルオキシソーム上で異なった割合でペルオキシソーム上膜ペルオキシン群と複合体を形成していること等を明らかにした。さらに、Pex5pのドミナントネガディブ変異体を線虫の神経細胞に発現させ、線虫の神経細胞においてペルオキシソーム形成を阻害し、神経におけるペルオキシソームの役割を明らかにする事を試みた。結果、神経細胞にPex5pドミナントネガティブ変異体を発現した線虫は、行動に異常を示した。今後、この線虫をさらに詳細に解析する事で、神経系におけるペルオキシソームの高次機能について新規の知見を得る事ができると期待している。

The purpose of this study is to explain the formation mechanism of small cellular organs and molecular structures. This year, 1) Analysis of VDAC2-deficient CHO cells ZP114 and 2) Pyrotechnics Pex5p receptor Pex7p intracellular dynamics in PTS receptor The in vitro transport system is analyzed by the user. 1) In the previous year, the cells were defective and VDAC2 was defective.によって Hyperactive されているアポトーシス応Answer がSuppressed され, same as When the にペルオキシソーム form can がreply する事を见い出した. This year's は, この results けて, アポトーシス promotion factor であるBakがZP114 においてペルオキシソーム formation に対してWhat is the influence of らかの and えているのではないかと卡え, ZP114 に対して, RNA interference method によってBak の発appears to inhibit した. As a result, I figured out that the ZP114 において and the ペルオキシソーム formed the energy recovery が観看された. 2) The application of Pex7p in vitro delivery system and the analysis of intracellular dynamics of Pex7p. Result, Pex7p and Pex5p are the same, ATP-independent にペルオキシソームにしてインポートされること、Pex7pとPex5pがペルオキシソーム上でdifferentなった开合でペルオThe キシソーム upper membrane ペルオキシンgroup and the complex をformation していること Waiting を明らかにした.さらに、Pex5pのドミナントネガディブ変 allogeneic を nematode の神経cell に発appear させ、 nematode の神経cell においてペルオキシソーム form を hinder し、神経におけるペルオキシソームのservice cut を明らかにする事をtrialみた. As a result, the Pex5p cells were found to be of the same type as the nematode nematode, and the behavior was abnormal. From now on, the detailed analysis of the nematode nematode and the detailed analysis of the nematode and the god of the godsソームのHigh-level functionについて新regulationの知见をgetる事ができるとLook forward to している.