リンパ節HEVに選択的に高発現する新規L-セレクチンリガンドの同定と機能解析

淋巴结 HEV 中选择性高表达的新型 L-选择素配体的鉴定和功能分析

• 批准号: 04J61630
• 负责人: 梅本 英司
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04J61630/
• 关键词: リンパ球ホーミング; リンパ球ローリング; 接着分子; セレクチン

リンパ球ホーミングはリンパ球が高内皮性細静脈(HEV)と特異的な相互作用をすることから始まる。この相互作用はリンパ球上のL-セレクチンを介したローリング及び接着、血管外遊走から成る多段階反応である。我々はこれまで、HEVに発現し、ムチン様ドメインとIgドメインを併せ持つ新規膜タンパク質nepmucin(申請時はHev-2の仮称であったが、今回正式に命名)を同定し、リンパ節に発現しているnepmucinがL-セレクチン結合性糖鎖を有することを明らかにした。今年度、我々はnepmucinが生体内においてL-セレクチンリガンドとして機能するかについて明らかにするために、HEVにおけるL-セレクチン結合性糖鎖の生合成に必要な酵素群(LSST, FucTVII, C1GnT, C2GnT)を導入した細胞株を用いnepmucln/IgGキメラを作製し、このキメラ蛋白質がリンパ球ローリングを媒介するかについて検討した。その結果、nepmucin/IgGは既知のリンパ球ローリングを媒介する分子GlyCAM/IgGと少なくとも同程度に効率よくL-セレクチン依存性ローリングを媒介することが示された。Nepmucinを介したこのローリングはnepmucinのムチン様ドメインを介するが、我々は更にnepmucinがそのIgドメインを介して、L-セレクチン非依存的なリンパ球接着を媒介することを見出した。この接着はPMA等の刺激により亢進した。予備的な結果ではあるが、この接着を阻害する抗nepmucinモノクローナル抗体をマウスに静脈投与したところ、HEVに結合するリンパ球数が減少したことから、HEVに発現するnepmucinはin vivoでリンパ球ホーミングに重要な役割を果たしていることが示唆された。

淋巴细胞的饲养始于与高内皮静脉（HEVS）具有特定相互作用的淋巴细胞。这种相互作用是一种多阶段响应，由L-选择素介导的滚动和淋巴细胞上的粘附以及外部效果组成。我们以前已经确定了一种新型的膜蛋白nepmucin（在应用时是HEV-2的暂定名称，但现在已正式命名），该膜在HEV中表达，并具有类似粘蛋白的域和一个IG结构域，并且已经透露NEPMUCIN（淋巴结淋巴结中，具有L-Selcectin-indseclectIndsning-nInding-nInding-inding gylindsning nides nepmucin均表现出来。在这个财政年度，为了澄清体内的Nepmucin是否起作用为L-选择蛋白配体，我们使用了已引入酶（LSST，FuctVII，C1GNT，C2GNT）中的细胞系，用于该l-Selectin结合型l-Selecting Glycans的生物合成以及对Hev和Shiper的生物合成，是否是hev，and Respeient inventiate in。滚动。结果表明，Nepmucin/igG介导L-选择素依赖性滚动至少与已知的淋巴细胞滚动分子Lycam/IgG一样有效。这种通过NEPMUCIN滚动是通过Nepmucin的粘蛋白样结构域的，但我们进一步发现Nepmucin通过其Ig结构域介导L-选择蛋白独立的淋巴细胞粘附。诸如PMA之类的刺激增强了这种粘附。尽管初步结果，但抑制这种粘附的抗抑郁蛋白单克隆抗体的静脉注射减少了与HEV结合的淋巴细胞的数量，表明在HEV中表达的NEPMUCIN在HEV中表达，在体内淋巴细胞寄居中起重要作用。