ラット後肢懸垂誘発萎縮ヒラメ筋線維におけるデスミンとプレクチンの発現解析

大鼠后肢悬吊诱导的比目鱼肌萎缩肌纤维中结蛋白和凝集素的表达分析

基本信息

项目摘要

本研究は、後肢懸垂と後肢懸垂後のラットヒラメ筋における、デスミンとプレクチンの遺伝子発現をRT-PCR法やin situハイブリダイゼーションなどの分子生物学的手法を用いて解析することを目的とする。平成17年度は、正常群、2週間、4週間の後肢懸垂群と、4週間懸垂後、3日間、1週間、2週間の懸垂解除群を作製し、各モデルのヒラメ筋に対するデスミン、プレクチンのin situハイブリダイゼーションを施行し観察した。その結果、正常群、2週間、4週間懸垂群に対するデスミン、プレクチンのin situハイブリダイゼーションでは、明瞭な反応は見られなかったが、懸垂解除群に対するデスミシのin situハイブリダイゼーションでは、3日間、1週間、2週間ともに、局所的ではあるが一部の筋線維に有意な陽性反応が見られた。このような筋線維は、HE染色標本で好塩基性の筋形質を持ち、中心核や筋線維周囲に核が多数見られる再生中の筋線維にほぼ一致していた。また、プレクチンのin situハイブリダイゼーションにおいても、弱い陽性反応を示す筋線維が懸垂解除群に見られ、それらはデスミンの反応と同様、筋線維周囲に核が多数見られる再生中の筋線維にほぼ一致していた。以上の結果から、正常個体における通常の状態では、in situハイブリダイゼーションで陽性となる程のタンパク合成は行われておらず、後肢懸垂期間における筋萎縮の進行期においても、この傾向は変わらないと思われる。これは筋線維が萎縮していく時は、細胞骨格を増強、拡張していく必要がないためではないかと推測される。しかし、懸垂が解除され、萎縮筋線維が肥大していく過程では、細胞骨格の再構成、増強、拡張が必要なため、デスミンとプレクチンのタンパク合成がより活動的に行われると考えられる。一方、懸垂解除後に、一部の再生線維以外の筋線維でin situハイブリダイゼーションの有意な陽性反応が見られないのは、萎縮進行期ではデスミン、プレクチンはともに変性、崩壊せず、それぞれの立体構造の変化(disorganization)が主体であり、懸垂解除期には、変性せずに保持されていたデスミン、プレクチンが再度、もとの構造を再構成(re organization)されるため、両タンパクを積極的に合成する必要がないためではないかと推測した。
In this study, we used RT-PCR and molecular biological methods to analyze the gene expression of the hind limb suspension and hind limb suspension. In the year of Heisei 17, the control of normal group, hind limb overhang group during 2 weeks and 4 weeks, overhang release group after 4 weeks, 3 days, 1 week and 2 weeks, and the control of each side of the body were carried out. Results: Normal group, 2-week, 4-week pendent group, 2-week pendent group, 2-week In this paper, the author points out that the core structure of the tendon is consistent with the core structure of the tendon. In the case of the suspension of the tendon dimension, the suspension of the tendon dimension can be seen in the case of the suspension of the tendon dimension, and the suspension of the tendon dimension can be seen in the case of the suspension of the tendon dimension. The above results show that normal individuals are in the normal state, in situ, in the normal state, in the normal state, in the normal state The muscle line shrinks, the cell skeleton strengthens, and the tension increases. In the process, the cell skeleton is reconstructed, strengthened, expanded and necessary, and the suspension is released and the contraction of the tendon is enlarged. One side, after the suspension is released, one part of the regeneration line dimension outside the tendon dimension is in situ, and the other part of the regeneration line dimension is in situ.(disorganization): main body, suspension release period, reverse, reverse.

项目成果

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